1.6 Методи фармацевтичного аналізу та їх класифікація

Розділ 2. Фізичні методи аналізу

2.1 Перевірка фізичних властивостей чи вимірювання фізичних констант лікарських речовин

2.2 Встановлення рН середовища

2.3 Визначення прозорості та каламутності розчинів

2.4 Оцінка хімічних констант

Розділ 3. Хімічні методи аналізу

3.1 Особливості хімічних методів аналізу

3.2 Гравіметричний (ваговий) метод

3.3 Титриметричні (об'ємні) методи

3.4 Газометричний аналіз

3.5 Кількісний елементний аналіз

Розділ 4. Фізико-хімічні методи аналізу

4.1 Особливості фізико-хімічних методів аналізу

4.2 Оптичні методи

4.3 Абсорбційні методи

4.4 Методи, засновані на випромінюванні випромінювання

4.5 Методи, що ґрунтуються на використанні магнітного поля

4.6 Електрохімічні методи

4.7 Методи поділу

4.8 Термічні методи аналізу

Глава 5. Біологічні методи аналізу1

5.1 Біологічний контроль якості лікарських засобів

5.2 Мікробіологічний контроль лікарських засобів

Список використаної літератури

Вступ

Фармацевтичний аналіз - це наука про хімічної характеристикита вимірі біологічно активних речовин на всіх етапах виробництва: від контролю сировини до оцінки якості отриманої лікарської речовини, вивчення її стабільності, встановлення термінів придатності та стандартизації готової лікарської форми. Фармацевтичний аналіз має свої специфічні особливості, що відрізняють його від інших видів аналізу. Ці особливості полягають у тому, що аналізу піддають речовини різної хімічної природи: неорганічні, елементорганічні, радіоактивні, органічні сполуки від простих аліфатичних до складних біологічно активних природних речовин. Надзвичайно широкий діапазон концентрацій аналізованих речовин. Об'єктами фармацевтичного аналізу є як індивідуальні лікарські речовини, а й суміші, містять різне число компонентів. Кількість лікарських засобів з кожним роком зростає. Це викликає необхідність розробки нових методів аналізу.

Способи фармацевтичного аналізу потребують систематичного вдосконалення у зв'язку з безперервним підвищенням вимог до якості лікарських засобів, причому зростають вимоги як до ступеня чистоти лікарських речовин, так і кількісного змісту. Тому необхідне широке використання як хімічних, а й більш чутливих фізико-хімічних методів з метою оцінки якості ліків.

До фармацевтичного аналізу висувають високі вимоги. Він має бути досить специфічний і чутливий, точний по відношенню до нормативів, обумовлених ГФ XI, ВФС, ФС та іншою НТД, виконуватися в короткі проміжки часу з використанням мінімальних кількостей випробуваних лікарських засобів та реактивів.

Фармацевтичний аналіз залежно від поставлених завдань включає різні форми контролю за якістю ліків: фармакопейний аналіз, постадійний контроль виробництва лікарських засобів, аналіз лікарських форм індивідуального виготовлення, експрес-аналіз в умовах аптеки та біофармацевтичний аналіз.

Складовою фармацевтичного аналізу є фармакопейний аналіз. Він є сукупністю способів дослідження лікарських препаратів та лікарських форм, викладених у Державній фармакопеї або іншій нормативно-технічній документації (ВФС, ФС). На підставі результатів, отриманих при виконанні фармакопейного аналізу, робиться висновок про відповідність лікарського засобу вимогам ДФ або іншої нормативно-технічної документації. У разі відхилення від цих вимог ліки до застосування не допускають.

Висновок якості лікарського засобу можна зробити тільки на підставі аналізу проби (вибірки). Порядок її відбору зазначений або у приватній статті, або у загальній статті ДФ XI (вип. 2). Відбір проби роблять тільки з непошкоджених закупорених та упакованих відповідно до вимог НТД пакувальних одиниць. При цьому повинні суворо дотримуватися вимог до запобіжних заходів роботи з отруйними та наркотичними лікарськими засобами, а також до токсичності, вогненебезпечності, вибухонебезпечності, гігроскопічності та інших властивостей ліків. Для випробування відповідність вимогам НТД проводять багатоступінчастий відбір проб. Число ступенів визначається видом упаковки. На останньому ступені (після контролю за зовнішнім виглядом) беруть пробу в кількості, необхідної для чотирьох повних фізико-хімічних аналізів (якщо проба відбирається для контролюючих організацій, то на шість таких аналізів).

З розфасовки "ангро" беруть точкові проби, взяті в рівних кількостях із верхнього, середнього та нижнього шарів кожної пакувальної одиниці. Після встановлення однорідності усі ці проби змішують. Сипучі та в'язкі лікарські засоби відбирають пробовідбірником, виготовленим з інертного матеріалу. Рідкі лікарські засоби перед відбором проб ретельно перемішують. Якщо це важко, то відбирають точкові проби з різних шарів. Відбір вибірок готових лікарських засобів здійснюють відповідно до вимог приватних статей або інструкцій з контролю, затверджених МОЗ РФ.

Виконання фармакопейного аналізу дозволяє встановити справжність лікарського засобу, його чистоту, визначити кількісний вміст фармакологічно активної речовини або інгредієнтів, що входять до складу лікарської форми. Незважаючи на те, що кожен із цих етапів має свою конкретну мету, їх не можна дивитись ізольовано. Вони взаємопов'язані та взаємно доповнюють один одного. Так, наприклад, температура плавлення, розчинність, рН середовища водного розчину і т.д. є критеріями як справжності, і чистоти лікарської речовини.

Глава 1. Основні засади фармацевтичного аналізу

1.1 Критерії фармацевтичного аналізу

На різних етапах фармацевтичного аналізу, залежно від поставлених завдань, мають значення такі критерії, як вибірковість, чутливість, точність, час, витрачений на виконання аналізу, витрачена кількість аналізованого препарату (лікарської форми).

Вибірковість методу дуже важлива при проведенні аналізу сумішей речовин, оскільки дає можливість набувати справжніх значень кожного з компонентів. Тільки вибіркові методики аналізу дозволяють визначати зміст основного компонента у присутності продуктів розкладання та інших домішок.

Вимоги до точності та чутливості фармацевтичного аналізу залежать від об'єкта та мети дослідження. При випробуванні ступеня чистоти препарату використовують методики, що відрізняються високою чутливістю, що дозволяють встановлювати мінімальний вміст домішок.

За виконання постадійного контролю виробництва, і навіть під час проведення експрес-аналізу за умов аптеки важливу роль має чинник часу, що витрачається виконання аналізу. Для цього вибирають методи, що дозволяють провести аналіз у найбільш короткі проміжки часу та водночас із достатньою точністю.

При кількісному визначенні лікарської речовини використовують метод, який відрізняється вибірковістю та високою точністю. Чутливістю методу нехтують з огляду на можливість виконання аналізу з великою наважкою препарату.

Мірою чутливості реакції є межа виявлення. Він означає найменший зміст, при якому за цією методикою можна виявити присутність обумовленого компонента із заданою довірчою ймовірністю. Термін "межа виявлення" введений замість такого поняття, як "відкривається мінімум", ним користуються також замість терміну "чутливість". досвіду Це слід враховувати при розробці методик якісного фармацевтичного аналізу.Для встановлення чутливості реакцій все ширше використовують показник поглинання (питомий або молярний), що встановлюється спектрофотометричним методом.У хімічному аналізі чутливість встановлюють за величиною межі виявлення даної реакції. аналізу Найбільш високочутливі радіохімічні та мас-спектральні методи, що дозволяють визначати 10 -8 -10 -9 % аналізованої речовини, полярографічні та флуориметричні 10 -6 -10 -9 %; потенціометричних 10-2%.

Термін "точність аналізу" включає одночасно два поняття: відтворюваність та правильність отриманих результатів. Відтворюваність характеризує розсіювання результатів аналізу проти середнім значенням. Правильність відображає різницю між дійсним та знайденим вмістом речовини. Точність аналізу в кожного методу різна і залежить від багатьох факторів: калібрування вимірювальних приладів, точності відвішування чи відмірювання, досвідченості аналітика тощо. Точність результату аналізу не може бути вищою, ніж точність найменш точного виміру.

Так, при обчисленні результатів титриметричних визначень найменш точна цифра - кількість мілілітрів титранта, витраченого на титрування. У сучасних бюретках залежно від класу їхньої точності максимальна помилка відмірювання близько ±0,02 мл. Помилка від натікання також дорівнює ±0,02 мл. Якщо при зазначеній загальній помилці відмірювання та натікання ±0,04 мл на титрування витрачається 20 мл титранта, то відносна помилка становитиме 0,2%. При зменшенні навішування та кількості мілілітрів титранту точність відповідно зменшується. Таким чином, титриметричне визначення можна виконувати відносною похибкою ±(0,2-0,3)%.

Точність титриметричних визначень можна підвищити, якщо користуватися мікробюретками, застосування яких значно зменшує помилки від неточного відмірювання, натікання та впливу температури. Похибка допускається також під час взяття навішування.

Відважування навішування під час аналізу лікарської речовини здійснюють з точністю до ±0,2 мг. При взятті звичайної для фармакопейного аналізу навішування 0,5 г препарату та точності зважування ±0,2 мг відносна помилка дорівнюватиме 0,4%. При аналізі лікарських форм, виконанні експрес-аналізу така точність при відважуванні не потрібна, тому навішування беруть з точністю ±(0,001-0,01) г, тобто. із граничною відносною помилкою 0,1-1%. Це можна віднести і до точності відважування навішування для колориметричного аналізу, точність результатів ±5%.

1.2 Помилки, можливі під час проведення фармацевтичного аналізу

При виконанні кількісного визначеннябудь-яким хімічним або фізико-хімічним методом можуть бути допущені три групи помилок: грубі (промахи), систематичні (визначені) та випадкові (невизначені).

Грубі помилки є результатом прорахунку спостерігача під час виконання будь-якої з операцій визначення чи неправильно виконаних розрахунків. Результати з грубими помилками відкидаються як недоброякісні.

Систематичні помилки відбивають правильність результатів аналізу. Вони спотворюють результати вимірювань зазвичай в один бік (позитивний або негативний) на деяке постійне значення. Причиною систематичних помилок в аналізі може бути, наприклад, гігроскопічність препарату при відважуванні його навішування; недосконалість вимірювальних та фізико-хімічних приладів; досвідченість аналітика і т.д. Систематичні помилки можна частково усунути внесенням поправок, калібруванням приладу тощо. Однак завжди необхідно добиватися того, щоб систематична помилка була порівнянна з помилкою приладу і не перевищувала випадкової помилки.

Випадкові помилки відбивають відтворюваність результатів аналізу. Вони викликаються неконтрольованими змінними. Середнє арифметичне випадкових помилок прагне до нуля при постановці величезної кількості дослідів в тих самих умовах. Тому для розрахунків необхідно використовувати не результати одиничних вимірів, а середнє з кількох паралельних визначень.

Правильність результатів визначень виражають абсолютною помилкою та відносною помилкою.

Абсолютна помилка є різницею між отриманим результатом і істинним значенням. Ця помилка виявляється у тих самих одиницях, як і визначається величина (грамах, мл, відсотках).

Відносна помилка визначення дорівнює відношенню абсолютної помилки до справжнього значення визначається величини. Виражають відносну помилку зазвичай у відсотках (помножуючи отриману величину на 100). Відносні помилки визначень фізико-хімічними методами включають як точність виконання підготовчих операцій (зважування, відмірювання, розчинення), і точність виконання вимірювань на приладі (інструментальна помилка).

Значення відносних помилок залежить від того, яким методом виконують аналіз і що є аналізований об'єкт - індивідуальна речовина або багатокомпонентну суміш. Індивідуальні речовини можна визначати при аналізі спек-трофотометричним методом в УФ- та видимій областях з відносною похибкою ±(2-3)%, ІЧ-спектрофотометрією ±(5-12)%, газо- рідинною хроматографією ±(3-3,5) %; полярографією ±(2-3)%; потенціометрією ±(0,3-1)%.

При аналізі багатокомпонентних сумішей відносна похибка визначення цими методами зростає приблизно вдвічі. Поєднання хроматографії з іншими методами, зокрема використання хроматооптичних та хроматоелектрохімічних методів дозволяє виконувати аналіз багатокомпонентних сумішей з відносною похибкою ±(3-7)%.

Точність біологічних методів набагато нижча, ніж хімічних та фізико-хімічних. Відносна помилка біологічних визначень сягає 20-30 і навіть 50%. Для підвищення точності ГФ XI введено статистичний аналіз результатів біологічних випробувань.

Відносна помилка визначення може бути зменшена за рахунок збільшення числа паралельних вимірів. Однак ці можливості мають певну межу. Зменшувати випадкову помилку вимірювань, збільшуючи кількість дослідів, доцільно доти, доки вона стане меншою за систематичну. Зазвичай у фармацевтичному аналізі виконують 3-6 паралельних вимірів. При статистичній обробці результатів визначень для одержання достовірних результатів виконують щонайменше семи паралельних вимірів.

1.3 Загальні принципи випробувань автентичності лікарських речовин

Випробування на справжність - це підтвердження ідентичності аналізованої лікарської речовини (лікарської форми), яке здійснюється на основі вимог Фармакопеї або іншої нормативно-технічної документації (НТД). Випробування виконують фізичними, хімічними та фізико-хімічними методами. Неодмінною умовою об'єктивного випробування справжності лікарської речовини є ідентифікація тих іонів та функціональних груп, що входять до структури молекул, що зумовлюють фармакологічну активність. За допомогою фізичних та хімічних констант (питомого обертання, рН середовища, показника заломлення, УФ- та ІЧ-спектру) підтверджують інші властивості молекул, що впливають на фармакологічний ефект. Хімічні реакції, що застосовуються у фармацевтичному аналізі, супроводжуються утворенням пофарбованих сполук, виділенням газоподібних або нерозчинних у воді сполук. Останні можна ідентифікувати за температурою плавлення.

1.4 Джерела та причини недоброякісності лікарських речовин

Основні джерела технологічних та специфічних домішок – апаратура, вихідна сировина, розчинники та інші речовини, які використовують при отриманні лікарських засобів. Матеріал, з якого виготовлена ​​апаратура (метал, скло), може бути джерелом домішок важких металів та миш'яку. При поганому очищенні в препаратах можуть бути домішки розчинників, волокна тканин або фільтрувального паперу, пісок, азбест і т.д., а також залишки кислот або лугів.

На якість синтезованих лікарських речовин можуть впливати різні чинники.

Технологічні чинники - перша група чинників, які впливають у процесі синтезу лікарської речовини. Ступінь чистоти вихідних речовин, температурний режим, тиск, рН середовища, розчинники, що застосовуються в процесі синтезу і для очищення, режим і температура сушіння, що коливається навіть у невеликих межах, - всі ці фактори можуть призвести до появи домішок, які накопичуються від однієї до іншої стадії. При цьому можуть відбуватися утворення продуктів побічних реакцій або продуктів розпаду, процеси взаємодії вихідних і проміжних продуктів синтезу з утворенням таких речовин, від яких потім важко відокремити кінцевий продукт. У процесі синтезу можливе також утворення різних таутомерних форм як у розчинах, і у кристалічному стані. Так, наприклад, багато органічних сполук можуть існувати в амідній, імідній та інших таутомерних формах. Причому нерідко залежно від умов отримання, очищення та зберігання лікарська речовина може бути сумішшю двох таутомерів або інших ізомерів, у тому числі оптичних, що відрізняються за фармакологічною активністю.

Друга група факторів – утворення різних кристалічних модифікацій, або поліморфізм. Близько 65% лікарських речовин, що належать до барбітуратів, стероїдів, антибіотиків, алкалоїдів та ін, утворюють по 1-5 і більше різних модифікацій. Інші дають при кристалізації стабільні поліморфні та псевдополіморфні модифікації. Вони різняться не тільки за фізико-хімічними властивостями (температурою плавлення, щільністю, розчинністю) та фармакологічною дією, але мають різну величину вільної поверхневої енергії, а отже, неоднакову стійкість до дії кисню повітря, світла, вологи. Це викликано змінами енергетичних рівнів молекул, що впливає на спектральні, термічні властивості, розчинність та абсорбцію лікарських речовин. Освіта поліморфних модифікацій залежить від умов кристалізації, використовуваного при цьому розчинника температури. Перетворення однієї поліморфної форми на іншу відбувається при зберіганні, сушінні, подрібненні.

У лікарських речовинах, що одержуються з рослинної та тваринної сировини, основними домішками є супутні природні сполуки (алкалоїди, ферменти, білки, гормони та ін.). Багато з них дуже подібні за хімічною будовою та фізико-хімічними властивостями з основним продуктом екстракції. Тому очищення його становить велику складність.

Великий вплив на забруднення домішками одних лікарських препаратів іншими може зробити запиленість виробничих приміщень хіміко-фармацевтичних підприємств. У робочій зоні цих приміщень за умови отримання одного або декількох препаратів (лікарських форм) усі вони можуть утримуватися у вигляді аерозолів у повітрі. При цьому відбувається так зване "перехресне забруднення".

Всесвітньою організацією охорони здоров'я (ВООЗ) у 1976 р. було розроблено спеціальні правилаорганізації виробництва та контролю за якістю лікарських засобів, які передбачають умови запобігання "перехресному забруднення".

Важливе значення якості ліків мають як технологічний процес, а й умови зберігання. На доброякісність препаратів впливає надмірна вологість, яка може призвести до гідролізу. В результаті гідролізу утворюються основні солі, продукти омилення та інші речовини з іншим характером фармакологічної дії. При зберіганні препаратів-кристаллогідратів (натрію арсенат, міді сульфат та ін.) необхідно, навпаки, дотримуватись умов, що виключають втрату кристалізаційної води.

При зберіганні та транспортуванні препаратів необхідно враховувати вплив світла та кисню повітря. Під впливом цих факторів може відбуватися розкладання, наприклад, таких речовин, як хлорне вапно, срібло нітрат, йодиди, броміди і т.д. Велике значення має якість тари, яка використовується для зберігання лікарських препаратів, а також матеріал, з якого вона виготовлена. Останній також може бути джерелом домішок.

Отже, домішки, які у лікарських речовинах, можна розділити на дві групи: домішки технологічні, тобто. внесені вихідною сировиною або утворені в процесі виробництва та домішки, придбані в процесі зберігання або транспортування, під впливом різних факторів (теплоти, світла, кисню повітря і т.д.).

Вміст тих та інших домішок має строго контролюватись, щоб виключити присутність токсичних сполук або наявність індиферентних речовин у лікарських засобах у таких кількостях, які заважають їх використанню для конкретних цілей. Іншими словами, лікарська речовина повинна мати достатній рівень чистоти, а отже, відповідати вимогам певної специфікації.

Лікарська речовина є чистою, якщо подальше очищення не змінює її фармакологічної активності, хімічної стабільності, фізичних властивостей та біологічної доступності.

Останніми роками через погіршення екологічної обстановки на наявність домішок важких металів відчувають і лікарську рослинну сировину. Важливість проведення таких випробувань викликана тим, що при проведенні досліджень 60 різних зразків рослинної сировини встановлено вміст 14 металів, у тому числі таких токсичних, як свинець, кадмій, нікель, олово, сурма і навіть талій. Їх вміст у більшості випадків значно перевищує встановлені ГДК для овочів та фруктів.

Фармакопейний тест на визначення домішок важких металів - один із широко застосовуваних у всіх національних фармакопеях світу, які рекомендують його для дослідження не тільки індивідуальних лікарських речовин, але й олій, екстрактів, ін'єкційних лікарських форм. На думку Комітету експертів ВООЗ, такі випробування слід проводити щодо лікарських засобів, які мають разові дози щонайменше 0,5 г.

1.5 Загальні вимоги до випробувань на чистоту

Оцінка ступеня чистоти лікарського препарату – один із важливих етапів фармацевтичного аналізу. Усі лікарські препарати незалежно від способу одержання випробовують на чистоту. При цьому встановлюють вміст домішок. Їх

8-09-2015, 20:00

Інші новини

Уніфікація методів кількісного визначення лікарських засобів

Кількісне визначення – це завершальний етап фармацевтичного аналізу. Вибір оптимального методу кількісного визначення залежить від можливості оцінити лікарський засіб фармакологічно активної частини молекули. Практично це зробити складно, тому зазвичай кількісне визначення препарату проводять за однією його хімічною властивістю, пов'язаною з наявністю тієї чи іншої функціональної групи, атома, катіону або аніону, а в ряді випадків за кількістю пов'язаної з органічною основою мінеральної кислоти. Наприклад:папаверину гідрохлорид можна кількісно визначити за пов'язаною хлористоводневою кислотою, але це допускається лише за експрес-аналізу в умовах аптеки.

Існує значна різниця в аналізі субстанцій лікарських речовин та їх лікарських форм. Умови застосування методів кількісного аналізу в лікарських формах залежить від складу лікарської суміші та фізико-хімічних властивостей усіх інгредієнтів, що входять до неї. При аналізі багатокомпонентних лікарських сумішей використовують два підходи: кількісне визначення без попереднього поділу інгредієнтів та з їх поділом. При виборі способів кількісного визначення без розподілу інгредієнтів необхідно переконатися, що супутні інгредієнти не впливають на результати аналізу.

Класифікація методів кількісного визначення лікарських речовин

Фізичні	Хімічні	Фізико-хімічні	Біологічні
1. Визначення густини. 2. Температури кипіння.	1. Гравіметрія. 2. Титриметричні методи: Осаджувальне титрування; Кислотно-основне; Окисно-відновне титрування; Комплексонометрія; Нітритометрія. 3. Елементний аналіз. 4. Газометричні методи.	1. Абсорбційні методи. 2. Оптичні методи. 3. Методи, засновані на випромінюванні випромінювання. 4. Методи, що ґрунтуються на використанні магнітного поля. 5. Електрохімічні 6. Методи поділу. 7. Термічні методи.	1. Випробування токсичність. 2. Випробування на пірогенність. 4. Мікробіологічна чистота.

Фізичні методи

Ці методи використовують для кількісного визначення, наприкладетилового спирту. ФС рекомендує встановлювати вміст етилового спирту за щільністю, або за температурою кипіння водно-спиртових розчинів (у тому числі настоянок) за методиками ОФС ГФ.

Хімічні методи

1. Ваговий метод (гравіметрія)

Метод заснований на тому, що з досліджуваної речовини, взятої у вигляді точної навішування на аналітичних вагах або певному обсязі, відміряному за допомогою бюретки або піпетки, виділяють за допомогою хімічних реакцій складову частину у вигляді осаду. Цей осад відфільтровують та зважують. Для розрахунку кількісного вмісту речовини у препараті використовують формулу. Метод відрізняється високою точністю, але трудомісткий.

Гравіметрично кількісно визначають солі хініну, які під дією розчину лугу утворюють осад основи хініну; алкалоїди, обложені у вигляді пікратів; натрієві солі барбітуратів, що при дії кислоти утворюють опади кислотних форм; деякі вітаміни, що утворюють нерозчинні у воді продукти гідролізу.

2. Титриметричні (об'ємні) методи

Відрізняються значно меншою трудомісткістю, ніж гравіметричний метод, та досить високою точністю.

Осаджувальне титрування

Метод ґрунтується на використанні реакцій осадження або утворення малодисоційованих сполук.

Аргентометрія

Метод ґрунтується на реакціях осадження галогенідів розчином нітрату срібла.

KCI + AgNO 3 → AgCI ↓ + KNO 3 Е = М.м.

Пряме титрування: Метод Мору: середовище нейтральне, індикатор - хромат калію, визначають Cl - і Br -. Метод Фаянсу:середовище оцтовокисле, індикатор - флуоресцеїн (Cl -) та еозинат натрію (I - , Br -).

Зворотне титрування(роданометрія, тіоціанометрія): Метод Фольгарду:середовище азотнокисле, індикатор - залізоамонієві галун, титранти - AgNO 3 і NH 4 CNS, у точці еквівалентності з'являється червоне забарвлення. Непрямий метод Фольгарду:спочатку після додавання 0,1 мл 0,1 М розчину NH 4 CNS з'являється червоне фарбування від взаємодії з індикатором, а потім титрують розчином AgNO 3 до знебарвлення.

Аргентометрично визначають галогеніди лужних металів, четвертинних амонієвих основ, солі галогеноводородних кислот органічних основ, сульфамідів.

Наприклад: сульфаніламіди утворюють солі срібла у вигляді білого осаду.

Аргентометричний метод відрізняється високою чутливістю, правильністю та відтворюваністю, простий у виконанні. Проте значна витрата дорогого срібла вимагає його заміни.

Меркуріметрія

Метод заснований на утворенні слабодисоційованих сполук ртуті (II).

Точку еквівалентності встановлюють потенціометрично або за допомогою індикаторів - дифенілкарбазиду або дифенілкарбазону, які утворюють з надлишком іонів ртуті (II), пофарбовані в червоно-фіолетовий колір сполуки.

Під час аналізу йодидів можливий безіндикаторний метод.

2KI + Hg(NO 3) 2 → HgI 2 ↓ + 2KNO 3 (червоний осад)

HgI 2 + 2 KI → K 2 HgI 4 (безбарвний)

K 2 HgI 4 + Hg(NO 3) 2 → 2HgI 2 ↓ + 2KNO 3 (червоний осад)

Е = 2 М.м. Титрують до стійкої червоної каламуті.

Кислотно-основне титрування (метод нейтралізації)

Це методи кількісного визначення лікарських речовин, що володіють кислотними та основними властивостями у водному чи неводному середовищі.

Розчинні у воді речовини, що мають кислі властивості, титрують сильними основами (алкаліметрія), а речовини основного характеру – розчинами сильних кислот (ацидиметрія). Найчастіше використовують при титруванні індикатори: метиловий помаранчевий, метиловий червоний, бромтимоловий синій, фенолфталеїн, тимолфталеїн.

Ацидиметрія	Алкаліметрія
Водне середовище
Пряме титрування Титрують хлористоводневою кислотою натрієві солі неорганічних кислот. Наприклад: NaHCO 3 + HCl → NaCl + CO 2 + H 2 O	Пряме титрування Титрують неорганічні кислоти, речовини гетероциклічної структури, що містять у молекулі групу COOH. Наприклад: HCl + NaOH → NaCl + H 2 O
Зворотне титрування (Поєднання з гідролізом) Лікарські речовини, що являють собою складні ефіри або аміди, попередньо гідролізують розчином лугу, надлишок якого потім відтитрують кислотою. + 2NaOH → СН 3 СООNa + Н 2 О NaOH + HCl → NaCl + H 2 O	Зворотне титрування (Поєднання з гідролізом) Гідроліз складних ефірів або амідів зазвичай виконують титрованим розчином кислоти, а надлишок її відтитрують лугом (наприклад, уротропін). Паралельно проводять контрольний досвід.
	Непряме визначення Алкалоїди теоброміну та теофіліну беруть в облогу іонами срібла, при цьому виділяється еквівалентна кількість азотної кислоти, яку відтитрують лугом. N-H + AgNO 3 → N-Ag ↓ + HNO 3 HNO 3 + NaOH → NaNO 3 + H 2 O
Титрування у змішаних розчинниках
Іноді органічну основу витягують хлороформом або ефіром, розчинник відганяють і титрують основу ацидиметричним методом. N − + HCI → N − . HCI	Змішані розчинники складаються з води та органічних розчинників. Їх застосовують, коли препарат погано розчинний у воді або водні розчини мають слабовиражені кислотні або лужні властивості. Наприклад: саліцилова кислота розчиняється у спирті та титрується водним розчином NaOH. Деякі лікарські речовини при розчиненні змішаних розчинниках змінюють кислотно-основні властивості. Наприклад:борна кислота при розчиненні в суміші води та гліцерину підсилює кислотні властивостівнаслідок утворення одноосновної дигліцериноборної кислоти. Змішані розчинники(спирт + вода або ацетон + вода) використовують для алкаліметричного титрування сульфаніламідів. Розчинники, що не змішуються.(вода + хлороформ) використовують при кількісному визначенні солей органічних основ (наприклад, алкалоїди, новокаїн). Хлороформ витягує з водної фази органічну основу, що виділяється при титруванні лугом. N − . HCI + NaOH → N − ↓ + NaCI + Н 2 О
	Оксимний метод Заснований на нейтралізації еквівалентної кількості хлористоводневої кислоти, що виділилася в результаті взаємодії гідроксиламіну гідрохлориду з кетопохідними (наприклад, камфорою): С=O+NH 2 OH·HCl → C=N-OH↓ + HCl +H 2 O HCl + NaOH → NaCl + H 2 O
Титрування серед неводних розчинників (неводне титрування)
	Зворотне титрування (поєднання з етерифікацією) Деякі спирти і феноли, наприклад, (гліцерин, синестрол), ацетилюють у неводному середовищі оцтовим ангідридом. Потім надлишок оцтового ангідриду, нагріваючи з водою, перетворюють на оцтову кислоту, яку титрують лугом. 2R-OH + (CH 3 CO) 2 O → 2R-O - C -CH 3 + H 2 O (CH 3 CO) 2 O хат. + H 2 O → 2CH 3 COOH 2CH 3 COOH +2NaOH→ 2CH 3 COONa+2 Н 2 О Паралельно проводять контрольний досвід.
Органічні основи та їх солі ( наприклад: кофеїн, фтивазид) виявляють слабкі основні властивості, тому титрування виконують, використовуючи як розчинник безводну оцтову кислоту або оцтовий ангідрид. Титрант – розчин хлорної кислоти у безводній оцтовій кислоті. Індикатор – кристалічний фіолетовий у безводній оцтовій кислоті. Слабка органічна основа при роз- творінні в безводній оцтовій кислоті стає сильнішою основою: R 3 N + CH 3 COOH → R 3 N + − H + CH 3 COO - При приготуванні титранту утворюються перхлорат-іон та іон ацетонію: CH 3 COOH + HClO 4 → ClO 4 - + CH 3 COOH 2 + При титруванні: CH 3 COO - + CH 3 COOH 2 + → 2 CH 3 COOH, а R 3 N + − H + ClO 4 - → [ R 3 N + − H ] ClO 4 - Галогеніди четвертинних амонієвих основ і солі галогеноводородних кислот не можна точно відтитрувати в неводному середовищі, оскільки галоген-іони виявляють кислі властивості навіть серед безводної оцтової кислоти. Тому їх титрують у присутності (CH 3 COO) 2 Hg (можна взяти суміш мурашиної кислоти з оцтовим ангідридом 1:20), при цьому галогеніони зв'язуються в малодисоційовані сполуки. Приклади: димедрол, дибазол, промедол, ефедрину гідрохлорид.	Органічні речовини, що виявляють слабкі кислі властивості ( наприклад:феноли, барбітурати, сульфаніламіди) титрують, використовуючи як розчинник ДМФ. Титрант – розчин NaOH у CH 3 OH або розчин метилату натрію. Індикатор – тимоловий синій. R−OH + H−C−N−CH 3 → R−O - + H−C−N−CH 3 R−O - + CH 3 ONa → R−ONa + CH 3 O – CH 3 O - + H−C−N−CH 3 → CH 3 OH + H−C−N−CH 3 Недоліком неводного титрування є необхідність герметизованої установки титрування. Робота ведеться з дуже токсичними летючими розчинниками.

Окисно-відновне титрування

Методи засновані на використанні окисних та відновлювальних властивостей аналізованих речовин та, відповідно, титрантів.

Перманганатометрія

Метод заснований на використанні окисних властивостей титранту – перманганату калію в сильнокислому середовищі. При прямому титруваннііндикатором служить сам титрант, надлишок якого надає розчину рожевого забарвлення.

Цим методом титрують відновлене залізо, перекис водню.

2 КМnО 4 + 5 Н 2 О 2 + 3 Н 2 SО 4 → 2 МnSО 4 + К 2 SО 4 + 8 Н 2 О + 5 О 2

При зворотному титруваннінадлишок титранту встановлюють йодометрично. Кількісно визначають оберненим титруванням натрію нітрит.

5 NaNO 2 + 2 KMnO 4 + 3 H 2 SO 4 → 5 NaNO 3 + 2 MnSO 4 + K 2 SO 4 + 3 H 2 O

2 KMnO 4 + 10 KI + 8 H 2 SO 4 → 2 MnSO 4 + 5 I 2 + 6 K 2 SO 4 + 8 H 2 O

Індикатор – крохмаль.

Йодометрія

Метод заснований на використанні окисних властивостей вільного йоду та відновлювальних властивостях йодид-іонів: I 2 + 2ē ↔ 2I -

Цим методом визначають лікарські речовини, здатні окислитися або відновлюється, а також здатні утворювати з йодом продукти заміщення. Йодометрично можна визначати надлишок титранта у зворотному перманганатометричному, йодхлорметричному, йодатометричному, броматометричному методах.

Пряме титруванняйодом застосовують визначення натрію тіосульфату.

2 Na 2 S 2 O 3 + I 2 → Na 2 S 4 O 6 + 2 NaI

Індикатор – крохмаль.

Назадйодометричне визначення засноване на окисленні альдегідів йодом у лужному середовищі: I 2 + 2 NaOH → NaOI + NaI + H 2 O

R-C-H + NaOI + NaOH → R-C-ONa + NaI+H 2 O

Потім додають надлишок сірчаної кислоти, непрореагував гіпойодид перетворюється на йод, який відтитрують тіосульфатом натрію:

NaOI + NaI + Н 2 SО 4 → I 2 + Na 2 SO 4 + H 2 O

I 2 + 2 Na 2 S 2 O 3 → Na 2 S 4 O 6 + 2 NaI

Індикатором служить крохмаль, що утворює з йодом з'єднання, забарвлене синім кольором.

У лужному середовищі йодом окислюють фурацилін, окиснення ізоніазиду ведуть у розчині гідрокарбонату натрію. В основі йодометричного визначення метіоніну та анальгіну лежить реакція окислення сірки. Пеніциліни окислюють йодом після кислотного гідролізу.

Для кількісного визначення використовують поєднання реакцій заміщення або осадження з йодометрією. За допомогою титрованого розчину йоду одержують йодопохідні фенолів, первинних ароматичних амінів, антипірину, а також опади полійодидів алкалоїдів складу ∙ HI ∙ I 4 . Отримані опади відфільтровують, а надлишок йоду у фільтраті титрують натрію тіосульфатом.

Відновлювальні властивості калію йодиду використовують при титруванні заступника.

Лікарська речовина, що виявляє властивість окислювача, виділяє еквівалентну кількість вільного йоду при взаємодії з йодидом калію. Вільний йод, що виділився, відтитрують тіосульфатом натрію. Цим методом кількісно визначають перекис водню, калію перманганат, хлорне вапно, хлорамін, пантоцид.

Н 2 О 2 + 2 КІ + Н 2 SО 4 → I 2 + К 2 SО 4 + 2 Н 2 О

I 2 + 2 Na 2 S 2 O 3 → Na 2 S 4 O 6 + 2 NaI

Індикатор – крохмаль.

Йодхлорметрія

Це метод аналогічний до йодометрії. Але як титрант використовують розчин йодмонохлориду, який більш стійкий. Йодхлорметричним методом способом зворотного титруваннявизначають феноли та первинні ароматичні аміни. Аналізована речовина осаджується у вигляді йодпохідного, надлишок титранту встановлюють йодометрично:

ICI + KI → I 2 + KCI

Йодатометрія

Цим методом кількісно визначають, наприклад, аскорбінову кислоту. Лікарська речовина окислюється титрованим розчином йодату калію. Надлишок титранту встановлюють йодометрично, індикатор – крохмаль.

КІО 3 + 5 КІ + 6 HCI → 3 I 2 + 6 KCI + 3 H 2 O

I 2 + 2 Na 2 S 2 O 3 → Na 2 S 4 O 6 + 2 NaI

Броматометрія

Як титрант використовують бромат калію, що виявляє в кислому середовищі окислювальні властивості. Визначення зазвичай ведуть у присутності броміду.

КBrO 3 + 5 КBr + 6 HCI → 3 Br 2 + 6 KCI + 3 H 2 O

Виділився вільний бром витрачається або на окислення (гідразини та гідразиди), або на бромування (феноли та первинні ароматичні аміни) лікарської речовини. Індикаторами при прямому титруванніслужать барвники - азосполуки: метиловий червоний, метиловий помаранчевий - які окислюються і знебарвлюються під дією надлишку титранту в точці еквівалентності.

При зворотній броматометріїкінець титрування встановлюють йодометрично:

Br 2 + 2 KI → I 2 + 2 KBr

I 2 + 2 Na 2 S 2 O 3 → Na 2 S 4 O 6 + 2 NaI

Дихроматометрія

Метод заснований на осадженні деяких солей органічних основ титрованим розчином дихромату калію: 2 Cl - + K 2 Cr 2 O 7 → 2 Cr 2 O 7 + 2 KCl

Нерозчинні дихромати основ відфільтровують, а надлишок титранта визначають йодометрично: K 2 Cr 2 O 7 + 6 KI + 7 H 2 SO 4 → Cr 2 (SO 4) 3 + 3

I 2 + 2 Na 2 S 2 O 3 → Na 2 S 4 O 6 + 2 NaI

Визначають цим методом метиленовий синій та акрихін.

Цериметрія

Метод заснований на використанні стійкого титранту сульфату церію (IV), який у кислому середовищі відновлюється до сульфату церію (III): Ce 4+ + ē → Ce 3+

Прямим титруваннямвизначають сполуки заліза (II):

2 FeSO 4 + 2 Ce(SO 4) 2 → Fe 2 (SO 4) 3 + Ce 2 (SO 4) 3

При цьому використовують індикатори - дифеніламін або профенантролін (фероїн).

При зворотному титруваннінадлишок титранта визначають йодометрично:

2 Ce(SO 4) 2 + 2 KI → I 2 + Ce 2 (SO 4) 3 + K 2 SO 4

I 2 + 2 Na 2 S 2 O 3 → Na 2 S 4 O 6 + 2NaI

Комплексонометрія

Метод заснований на утворенні міцних, розчинних у воді комплексів катіонів металів з титрованим розчином трилону Б - динатрієвої сіллю етилендіамінтетраоцтової кислоти. Взаємодія відбувається у стехіометричному співвідношенні 1:1 незалежно від заряду катіону:

CH 2 COONa CH 2 COONa

CH 2 − N CH 2 − N

CH 2 COOH CH 2 COO

CH 2 COOH + MgSO 4 → CH 2 COO Mg + Н 2 SO 4

CH 2 − N CH 2 − N

CH 2 COONa CH 2 COONa

CH 2 COONa CH 2 COO

CH 2 − N CH 2 − N

CH 2 COOH CH 2 COO

CH 2 COOH + Bi 2 (SO 4) 3 → CH 2 COO Bi + Н 2 SO 4 + Na 2 SO 4

CH 2 − N CH 2 − N

CH 2 COONa CH 2 COO - Е = М/2.

При комплексонометричному титруванні дотримуються певного інтервалу значень pH, який досягається за допомогою буферних розчинів.

Індикатори, що застосовуються, називаються металоіндикаторами: КХТС (кислотний хром темно-синій), КХНС (кислотний хром чорний спеціальний), пірокатехіновий фіолетовий, ксиленоловий помаранчевий, кальконкарбонова кислота, мурексид. Перед досягненням точки еквівалентності вільні іони металу, що містяться в розчині, що титрується, зв'яжуться з титрантом. Останні порції титранта руйнують комплекс іона металу з індикатором, при цьому відбувається утворення комплексу металу з трилоном Б та вивільнення

вільних іонів індикатора, тому титрований розчин набуває фарбування вільного індикатора.

При прямому титруваннідо аналізованого розчину солей кальцію, магнію, цинку, вісмуту додають необхідний обсяг буферного розчину для досягнення потрібного значення рН та вказану в приватній статті кількість металоіндикатора. Потім титрують розчином трилону Б доти, поки в еквівалентній точці не відбудеться зміна забарвлення індикатора.

Зворотне титруваннязастосовують, якщо немає відповідного індикатора для прямого титрування, якщо реакція металу з трилоном Б йде повільно і якщо відбувається гідроліз металу при утворенні комплексонату.

При аналізі солей ртуті або свинцю надлишок трилону Б, який не вступив у взаємодію з аналізованим катіоном, відтитрують, використовуючи як титрант розчини солей цинку або магнію. Титрують також у присутності металоіндикатора та при певному значенні рН середовища.

Метод витіснення(або титрування за заступником) застосовують коли не можна підібрати відповідний індикатор, наприклад, при аналізі солей свинцю. Спочатку відому навішування солі магнію відтитрують трилоном Б в середовищі аміачного буфера в присутності металоіндикатора. Потім, після зміни забарвлення рідини, що титрується, додають навішення аналізованої солі свинцю. При цьому іони свинцю, утворюючи міцніший комплекс з трилоном Б, витісняє еквівалентну кількість іонів магнію. Далі проводять кількісне визначення вмісту витіснених іонів магнію.

Нітритометрія

Метод заснований на реакціях взаємодії первинних та вторинних ароматичних амінів з нітритом натрію в кислому середовищі, у присутності каталізатора броміду калію та при зниженій температурі.

Первинні ароматичні аміни (новокаїн, сульфаніламіди) утворюють з титрантом діазосполуки: Ar-NH 2 + NaNO 2 + HCl → Cl - + NaCl + 2H 2 O

Вторинні ароматичні аміни (дикаїн) у тих же умовах утворюють N-нітророз'єднання: Ar-NH-R + NaNO 2 + HCl→ Ar-N – R + NaCl + H 2 O

Точку еквівалентності встановлюють за допомогою зовнішніх індикаторів (йодкрохмальний папір), внутрішніх індикаторів (тропеолін 00, нейтральний червоний) або потенціометрично.

3. Елементний аналіз

Використовують для кількісного визначення сполук, що містять азот, галогени, сірку, вісмут та ртуть.

Метод К'єльдаля

Це фармакопейний метод визначення азоту в органічних сполуках, що містять амінний, амідний та гетероциклічний азот. Він ґрунтується на поєднанні мінералізації органічної речовини з подальшим застосуванням кислотно-основного титрування. Спочатку здійснюють мінералізацію зразка, нагріваючи з концентрованою сірчаною кислотою в колбі К'єльдаля. Потім отриманий гідросульфат амонію обробляють лугом і відганяють аміак, що виділився, в приймач з борною кислотою. В результаті утворюється метаборат та тетраборат амонію, які титрують 0,1 М HCl. Паралельно виконують контрольний досвід підвищення точності аналізу.

Для речовин, що містять амідну групу, що легко гідролізується в лужному середовищі, використовують непрямий методКьєльдаля. Це спрощений варіант, у якому виключена стадія мінералізації. Препарат руйнують лугом у колбі К'єльдаля і відганяють аміак, що виділився (або діалкиламін) в приймач. Метод трудомісткий.

Метод спалювання у колбі з киснем

Метод заснований на руйнуванні органічної речовини, що містить галогени, сірку, фосфор, спаленням у колбі, наповненій киснем у поглинаючій рідині та подальшому визначенні елементів, що знаходяться в розчині у вигляді іонів або молекул. Якісне та кількісне визначення виконують різними хімічними або фізико-хімічними методами. Перевага методу у швидкості мінералізації, у винятку втрат елемента у процесі мінералізації, високої чутливості аналізу.

Для аналізу галогеновмісних органічних речовин застосовують також і інші методи мінералізації (відновну, окислювальну та ін.).

Газометричний аналіз

Визначають кисень та циклопропан. Метод застосовується обмежено.

Фізико-хімічні методи аналізу

Ці методи відрізняються експресністю, вибірковістю, високою чутливістю, можливістю уніфікації та автоматизації, об'єктивністю оцінки якості препарату з фармакологічно активної частини молекули. Фізико-хімічні методи використовують для випробувань справжності, доброякісності та кількісного визначення лікарських речовин.

Оптичніметоди засновані на визначенні показника заломлення променя світла в випробуваному розчині (рефрактометрія), вимірюванні інтерференції світла (інтерферомет-

рію), здатності розчину речовини обертати площину поляризованого променя (поляриметрія). Методи відрізняються мінімальною витратою аналізованої речовини.

АбсорбційніМетоди засновані на властивості речовин поглинати світло в різних областях спектру. Наприклад, СПФ - в УФ-спектрі, ФЕК - у видимій області спектру,

ІЧ-спектроскопія – в ІЧ-спектрі.

До методів, заснованих на випромінюванні випромінювання, відносяться фотометрія полум'я (вимірюють інтенсивність випромінювання спектральних ліній випробуваних елементів), флуориметрія (заснована на здатності речовин флуоресціювати в УФ-світлі) та радіохімічні методи (засновані на вимірі β - або γ - Випромінювання).

Методи, засновані на використанні магнітного поля,являють собою ЯМР-і ПМР-спектроскопію, а також мас-спектрометрію.

До електрохімічнимметодам відносяться потенціометрія, заснована на вимірі рівноважних потенціалів, що виникають на межі між випробуваним розчином та зануреним у нього електродом; полярографія, заснована на вимірюванні сили струму, що виникає на мікроелектроді при електровідновленні або електроокисленні аналізованої речовини в розчині; кулонометрія, заснована на вимірюванні кількості електрики, витраченої на електрохімічне відновлення або окислення іонів, що визначаються.

До методам поділувідносять хроматографію, засновану на поділі речовин за рахунок розподілу їх між рухомою та нерухомою фазами; електрофорез, що ґрунтується на здатності заряджених частинок до переміщення в електричному полі; екстракцію з твердої речовини або з розчину екстрагентом, що не змішується з вихідною фазою і легко відокремлюється від неї і від речовини, що екстрагується.

Термічні методи аналізузасновані на точній реєстрації рівноважного стану між кристалічною та рідкою фазами аналізованої речовини.

Біологічні методи аналізу

Біологічну оцінку якості лікарських засобів (антибіотиків, серцевих глікозидів, гормонів) проводять за силою фармакологічного ефекту або токсичності. Проводять біологічні випробування на тваринах, окремих ізольованих органах, окремих групах клітин, і навіть певних штамів мікроорганізмів. Активність препаратів виражають у ОД (одиниці дії). До біологічних випробувань відносять визначення пірогенності на кроликах, токсичності на мишах, визначення вмісту гістаміноподібних речовин на кішках.

Визначення Курсова робота >> Медицина, здоров'я

... Методиконтролю вихідної сировини D. Методианалізу проміжних продуктів. е. Методианалізу готового лікарського засоби...Ніфантьєв, О.Є. Абревіатури, терміни та визначенняу сфері обігу лікарських коштів: Словник-довідник / О.Є. Ніфантьєв, ...

Лекція №2
за курсом «Аналіз та контроль
якості лікарських засобів»
1

Короткий план лекції

1. Класифікація ЛХ. Загальна характеристика
фармакопейного аналізу ЛХ. Реактиви, що використовуються в
фармакопейний аналіз.
2. Фізико-хімічні властивості лікарських речовин
(агрегатний стан, зовнішній вигляд, забарвлення, кристалічність,
поліморфізм та методи його дослідження. Розчинність.
Кислотно-основні властивості лікарських речовин.
3. Фізичні константи лікарських засобів та методи
їх визначення.
4. Методи ідентифікації лікарських засобів
5. Домішки у лікарських засобах, класифікація,
методи ідентифікації та аналізу. Поняття про стресові
випробуваннях
6. Методи кількісного аналізу лікарських засобів
коштів
2

Класифікація ЛВ

1. Неорганічні речовини (похідні s-, p- та делементів).
2. Органічні речовини
2.1. Аліфатичні сполуки (алкани,
галогеналкани, спирти, альдегіди, прості ефіри,
вуглеводи, амінокислоти, карбонові кислоти)
2.2. Ароматичні сполуки (феноли,
ароматичні карбонові кислоти, ароматичні
амінокислоти, фенілалкіламіни,
сульфаніламіди);
2.3. Стероїдні сполуки, простагландини
3

Класифікація ЛВ (продовження)

2.3. Гетероциклічні сполуки
2.3.1. З'єднання, що містять один гетероатом
(похідні фурану, бензофурану, піридину,
хіноліну, ізохіноліну та ін);
2.3.2. З'єднання містять два і більше
однакових гетероатома (похідні піразолу,
імідазолу, бензімідазолу, пурину, птеридину та
ін).
2.3.3. З'єднання, що містять два і більше різних
гетероатомів (похідні тіазолу, бензотіазолу,
оксазолідинів та ін.).
2.4. Елементорганічні речовини.
3. Радіофармацевтичні препарати.
4. Біотехнологічні (високомолекулярні)
лікарські речовини
4

Фармацевтичний аналіз (аналіз ЛВ та ЛЗ)

Фармацевтичний аналіз – це розділ науки про
хімічній характеристиці та вимірі БАВ на всіх
етапах виробництва – від контролю сировини до оцінки
якості отриманого ЛВ, вивчення його стабільності
(встановлення термінів придатності) та стандартизації ЛФ та
ЛЗ.
особливості:
1. Проводиться аналіз абсолютно різних по
природу, структуру та властивості речовин
2. Вимірювані концентрації (змісту) перебувають у
діапазон від 10-9 (1 ppb) до 100%.
3. Аналізуються як індивідуальні ЛВ, а й їх
5
суміші.

Фармацевтичний аналіз (класифікації)

Залежно від поставлених завдань:
1. Фармакопійний аналіз
2. Постадійний контроль виробництва ЛВ та ЛЗ
3. Аналіз індивідуальних ЛЗ
4. Аптечний експрес-аналіз
5. Біофармацевтичний аналіз
Залежно від результату:
1. Якісний
2. Кількісний
3. Напівкількісний (граничні випробування)
6

Критерії фармацевтичного аналізу

1. Виборчість (специфічність, селективність) -
здатність однозначно оцінювати визначений
компонент вибраним методом незалежно від інших
присутніх речовин (домішок, продуктів розпаду та
ін) у випробуваному зразку в межах заданого
діапазон застосування.
2. Чутливість
2.1. Межа виявлення
2.2. Межа визначення
3. Правильність - відображення різниці між істинним
змістом визначеного компонента та
експериментальним результатом аналізу
4. Відтворюваність (прецизійність) -
характеристика «розсіювання» результатів біля
середнього значення визначається величини.
5. Робастність - характеристика стійкість методики
в часі.
Ці критерії встановлюються у процесі валідації 7
методів (методик)

Фармакопейний аналіз ЛХ (загальна структура)

агрегатний стан,
зовнішній вигляд,
забарвлення, кристалічність,
поліморфізм
Справжність
Перша ідентифікація
(Специфічний метод)
Друга ідентифікація
(Підтвердження)
Визначення
фізичних
констант,
ф/г властивостей
Фармакопійний
аналіз ЛВ
(Загальна структура)
температура плавлення, температура
затвердіння, температура краплі,
температурні межі перегонки
Температура кипіння,
щільність та в'язкість рідин, питома
обертання та показник заломлення
розчинність, pH
Визначення
домішок
Кількісне
визначення
Показники мікробної чистоти,
стерильність, апірогенність, відсутність вірусних тіл
8

Хімічна назва

Використовується номенклатура IUPAC
(International Union Pure Applied Chemistry) – Міжнародний союз
чистої та прикладної хімії)
(набагато рідше – тривіальні назви)
1) визначають тип номенклатури (замісна, радикально-функціональна);
2) визначають тип характеристичної групи, яку слід прийняти
за головну;
3) визначають родоначальну структуру (головний ланцюг, старшу
циклічну систему);
4) дають назву вихідній структурі та основним групам;
5) дають назву префіксам;
6) проводять нумерацію;
7) об'єднують часткові назви у загальну повну назву,
дотримуючись алфавітного порядку всім визначених префіксів.
Крім назви вказують структурну хімічну формулу
та брутто-формулу.
9

10. Приклад оформлення

2-(нафтален-1-ілметил)-4,5-дигідро-1Н-імідазолу
гідрохлорид
10

11. Приклад побудови хімічної назви органічної ЛХ

Вибір нумерації: від атома азоту,
найближчого до старшого заступника
(С=Про-групу).
Встановлення родоначальної
структури: 1,4-бензодіазепін;
Назва з урахуванням заступників: 2,3-дигідро-2Н-1,4-бензодіазепін-2-он;
Перерахування заступників: за
алфавіту – 7-Cl-1-Me-5-Ph
Разом:
7-хлор-1-метил-5-феніл-2,3дигідро-2Н-1,4-бензодіазепін-2-он
H3C
O
N
Cl
N
11

12. Приклад побудови хімічної назви органічної ЛХ (2)

2-метил-3-гідрокси4,5-ді
(гідроксиметил)піридин
HO
OH
4
3
5
2
HO
6
N
1
12

13. Опис ЛВ

1. Агрегатний стан (рідина, газ, тверде
речовина, кристалічність), колір, запах, особливі
властивості (гігроскопічність, легка окислюваність на
повітрі та ін), розмір частинок (для тв. речовин).
2. Поліморфізм - явище, характерне для
твердих речовин – здатність речовини у твердому
стан існувати в різних
кристалічних формах при тому самому
хімічний склад.
При описі сольватів (гідратів) використовується
термін «псевдополіморфізм» (мінливість
складу сольвату або гідрату).
13

14. Опис ЛВ – поліморфізм

Поліморфні форми виявляють
однакові хімічні властивості
у розчинах і розплавах, але в
твердому стані їх фізичні
(Щільність, Т плавл, стисливість)
та фізико-хімічні властивості
(розчинність і як наслідок
біодоступність) можуть
Значно відрізнятися.
Та з поліморфних форм,
яка має менше значення
вільної ентальпії, є
найбільш термодинамічно
стабільною, а решта форм
можуть бути у т.зв.
"метастабільному" стані. 14

15. Поліморфізм (приклади)

Алотропні форми вуглецю: a) лонсдейліт; б) діамант;
в) графіт; г) аморфний вуглець; д) C60 (фулерен);
е) графен; ж) одношарова нанотрубка
15

16. Поліморфізм (приклади)

Німесулід (на формулі показані торсіонні обертання та
упаковка, що відповідає поліморфній формі I)
16

17. Поліморфізм (приклади)

Німесулід (на формулі показані сумарні торсіонні
обертання та упаковка, що відповідає поліморфній формі II)
17

18. Поліморфізм (приклади)

Дані
рентгенівській
дифракції для
форм I та II
німесуліда
18

19. Поліморфізм (приклади)

Диференціальна скануюча калориметрія
(DSC) поліморфних форм німесуліду
19

20. Поліморфізм та біодоступність

Кінетика розчинення двох поліморфних
форм німесуліду (37С, рН 7,5)
20

21. Методи дослідження поліморфних форм

1. Рентгенівська дифракція (порошок та
кристали)
2. Диференціальна скануюча
калориметрія, мікрокалориметрія
3. Термогравіметрія
4. Аналіз поглинання вологи
5. ІЧ-Фур'є-спектроскопія
6. Раманівська спектроскопія
7. Вивчення розчинності (кінетики
розчинення)
21

22. Розмір частинок (порошки, пелети)

Для визначення розміру
частинок використовую набори
сит із квадратними
отворами,
виготовлені з інертних
матеріалів. Ступінь
подрібнення вказується з
використанням номера
сита (розмір сторони
отвори мкм).
Сучасні методи – методи
лазерного сканування
22

23. Розчинність

Дані про розчинність речовини означають
приблизну розчинність при температурі
20°С, якщо немає інших вказівок. Вираз
«розчинимо в стільки частинах» слід розуміти
як вказівку на число мілілітрів розчинника
(представлене зазначеним числом частин),
яких розчинний 1 г твердої речовини.
Іноді для позначення розчинності речовини
використовуються описові терміни (легко, погано,
важко і т.д.).
Класичний опис розчинності (довідники)
- 1 г речовини розчиняється в Х г розчинника при
температурі Т.
23

24. Розчинність

24

25. Кислотно-основні властивості

Не наводяться в нормативних документах щодо
контролю якості ЛХ, але мають вирішальне
значення при проведенні випробувань,
розчинності в водних середовищах, виборі
методик та методів аналізу, а також
всмоктування, розподілу,
біодоступності ЛХ.
За кислотно-основними властивостями всі
речовини поділяються на неіоногенні (не
кислота/не основа) та іоногенні –
кислоти (що виявляють в основному
кислотні властивості), основи, амфоліти.
25

26. Методи визначення фізичних констант

1. Гравіметрія
2. Рефрактометрія
3. Поляриметрія
4. Віскозиметрія (капілярна,
ротаційна)
5. Термометрія
26

27. Відносна щільність (d20)

Відносна щільність d є відношенням
маси певного обсягу речовини до маси рівної його
об'єму води за температури 20оС.
Відносну щільність d визначають за допомогою
пікнометра, густонаміру, гігростатичних ваг або ареометра
з точністю до десяткових знаків, позначених у приватній
статті. Атмосферний тиск при зважуванні не враховують,
оскільки пов'язана з ним помилка не перевищує одиниці в
третій десятковий знак.
Крім того, зазвичай використовують два інші визначення.
Відносна щільність речовини є
відношення маси певного обсягу речовини при
температурі 20оС до маси, що дорівнює йому обсягу води при
температурі 4оС.
Щільність ρ20 – це відношення маси речовини до його обсягу
за температури 20оС. Щільність виражають у кілограмах на
кубічний метр (1 кг/м3 = 10-3 г/см3). Найчастіше вимір
щільність виражається в грамах на кубічний сантиметр
27
(Г/см3).

28. Відносна щільність

28

29.

29

30. Показник заломлення

30

31. Рефрактометри

31

32.

32

33. Оптичне обертання

33

34. Оптичне обертання

34

35.

35

36. Поляриметрія (обладнання)

36

37. В'язкість

В'язкість (внутрішнє тертя) – властивість текучих тіл надавати
опір пересування однієї їх частини щодо
інший.
Текучі тіла можуть мати ньютоновський тип течії.
Ньютонівськими рідинами називають системи, в'язкість яких
не залежить від напруги зсуву і є постійною
величиною відповідно до закону Ньютона.
Для ньютонівських рідин розрізняють динамічну,
кінематичну, відносну, питому, наведену та
характеристичну в'язкість. Для неньютонівських рідин
характерна, переважно, структурна в'язкість.
Динамічна в'язкість або коефіцієнт в'язкості η – це
тангенціальна сила, що припадає на одиницю поверхні,
яка також називається напругою зсуву t, виражена в
паскалях (Па), яку необхідно докласти для того, щоб
перемістити шар рідини площею 1 м2 зі швидкістю (v) 1
метр за секунду (м.с-1), що знаходиться на відстані (х) 1 метр
щодо іншого шару, паралельно площі ковзання.
37

38. В'язкість (капілярний метод)

Методика. Випробовувану рідину,
має температуру 20оС, якщо в
приватної статті не зазначено іншу
температура, заливають у віскозиметр
через трубку (L) у такій кількості, щоб
заповнити розширення (А), але при цьому
рівень рідини у розширенні (В) повинен
залишитися нижче за вихід до вентиляційної
трубки (М). Віскозиметр у вертикальному
положенні занурюють у водяну баню при
температурі (20+/-0,1)оС, якщо у приватній
статті не вказано іншу температуру,
утримуючи його в цьому положенні не менше
30 хвилин для встановлення температурного
рівноваги. Трубку (М) закривають та
підвищують рівень рідини у трубці (N)
таким чином, щоб вона знаходилася
приблизно на 8 мм вище мітки (Е).
Утримують рідину на цьому рівні,
закривши трубку (N) та відкривши трубку (М).
Потім відкривають трубку (N) та вимірюють
час, за який рівень рідини
знизиться від мітки (Е) до мітки (F),
секундоміром з точністю до однієї п'ятої
секунди.
38

39. Температурні межі перегонки

39

40. Температура плавлення

1. Капілярний метод визначення температури
плавлення. Температура плавлення, визначена
капілярним методом, являє собою температуру, при
якої остання тверда частинка ущільненого стовпчика
речовини в капілярній трубці перетворюється на рідку фазу.
2. Відкритий капілярний метод - застосовують для
речовин, що мають аморфну ​​структуру, що не розтираються в
порошок і плавляться нижче температури кипіння води,
таких як жири, віск, парафін, вазелін, смоли.
3. Метод миттєвого плавлення – застосовують для твердих
речовин, що легко перетворюються на порошок.
4. Температура краплі - температура, при якій в
умовах, наведених нижче, перша крапля розплавленого
випробуваної речовини падає з чашки (жири, воски,
олії).
5. Температура затвердіння – максимальна температура,
за якої відбувається затвердіння переохолодженої рідини.
40

41. Визначення температури плавлення (інструментальне)

Відео процесу плавлення
Кольорове відео високого дозволудозволяє вивчати
речовини, що плавляться з розкладанням або мають
фарбування. За допомогою приладів можна також вивчати явища
41
термохромізм.

42. Справжність (методи)

1. Хімічні реакціїавтентичності:
А. Загальні реакції на справжність по
функціональним групам (первинні
ароматичні аміни, алкалоїди,
складні ефіри та ін.)
Б. Специфічні реакцію іони
В. Специфічні реакції на
органічні речовини
42

43. Приклади реакцій ідентифікації щодо функціональних груп

Реакція на первинну ароматичну аміногрупу:
43

44. Приклади реакцій ідентифікації щодо функціональних груп

Реакція на первинну аміногрупу
(нінгідринова реакція):
44

45. Специфічні реакцію іони

45

46. ​​Специфічні реакцію іони

46

47. Специфічні реакцію іони

Специфічні реакції на іони
поділяються:
1. Реакції осадження
2. ОВ реакції
3. Реакції розкладання
4. Реакції комплексоутворення
47

48. Специфічні реакції справжності

48

49.

49

50.

50

51.

51

52.

52

53.

53

54.

54

55.

55

56.

56

57. Справжність (методи)

2. Інструментальні методи
2.1. ІЧ-спектроскопія (ІЧ-Фур'є)
2.2. Абсорційна спектрофотометрія
в УФ та/або видимій області спектру
2.3. Хроматографічні методи (ТСХ,
ГХ, РХ)
2.4. Електрофорез, капілярний
електрофорез (включаючи пептидне
картування)
57

58. Справжність (методи)

3. Фізичні методи (визначення
фізичних констант):
3.1. Температура плавлення, кипіння,
температурні межі перегонки
3.2. Відносна густина.
3.3. Показник заломлення.
3.4. Кут оптичного обертання.
3.5. Визначення в'язкості.
58

59. Справжність (доказ)

Встановлення справжності ЛВ проводиться
щонайменше 2 методами!
Перша ідентифікація – специфічна
інструментальний метод (як правило ІКспектрометрія) + додатковий метод
(наприклад, хроматографічний або
хімічний метод)
Друга ідентифікація – підтвердження
автентичності (використовуються визначення
фізичних констант, додаткових
хімічних методів, абсорбційна
спектрофотометрія та ін.).
59

60. Домішки (класифікація)

1. Загальні технологічні домішки – які у процесі
виробництва.
1.1. Реагентні домішки (SO42-, Cl-, сульфатна зола та ін.)
1.2. Домішки від контакту з технологічним обладнанням(HM,
As, Pb, Cd, Fe та ін.)
1.3. Залишкові органічні розчинники
1.4. Вода, волога
2. Специфічні домішки – характерні для конкретного ЛХ та
включають:
2.1. Напівпродукти синтезу та специфічні реагенти
2.2. Побічні продукти синтезу
2.3. Супутні домішки (хімічно споріднені аналоги та
залишкові кількості пестицидів і супертоксикантів - для ЛВ
природного походження)
2.4. Стереоізомери-домішки (домішки енантіомерів)
2.5. Продукти розкладання та взаємодії з технологічними
домішками, вологою, киснем повітря, органічними
розчинниками та ін.
3. Механічні домішки
60

61. Домішки

1. Летючі (характеризуються втратою в масі при
висушуванні).
2. Неорганічні (встановлюються щодо
сульфатної золи, важких металів тощо).
3. Споріднені за структурою домішки (визначаються
хроматографічними методами або електрофорезом).
Окремо класифікують токсичні
(впливають на фармакологічний
ефект – тобто. є неприпустимими) та
нетоксичні (вказують на ступінь очищення
ЛВ) домішки.
61

62. Втрата в масі при висушуванні (метод гравіметрії)

Є сумарним неспецифічним показником,
характеризує наявність води (вологи), залишкових 62
органічних розчинників у ЛВ

63. Визначення води

1. Дистиляція (відгін) – для рідин
2. Титриметричний метод (метод До.
Фішера, мікрометод) – для твердих речовин
63

64. Фізичні та хімічні властивості, що характеризують чистоту

Прозорість та ступінь каламутності. Прозорі розчини
при освітленні їх електролампою на чорному тлі
спостерігається присутність нерозчинених частинок. Ступінь
каламутності встановлюють шляхом порівняння випробуваного
речовини з еталоном (або розчинником).
Забарвлення рідин встановлюють шляхом порівняння
випробуваних розчинів з рівним обсягом одного з еталонів при
освітлення на матово-білому тлі.
Адсорбційна здатність – встановлюється за
знебарвлення барвника (метиленовий синій) у розчині ЛВ
певної концентрації.
Домішки пофарбованих речовин (світлопоглинаючі домішки)
– для незабарвлених речовин визначається абсорбція
розчину ЛВ у воді або органічному розчиннику у видимій
сфери спектру.
64

65. Визначення золи

Метод гравіметрії
1. Загальна зола (ЛРС, ряд органічних
ЛВ) - спалювання навішування (1.0000 г)
випробуваного зразка в тиглі при Т
близько 500оС (30 хв), після
охолодження визначають масу залишку.
2. Сульфатна зола - навішування
змочують 1 мл Н2SO4 і далі
чинять як щодо загальної
золи.
65

66. Визначення "важких" металів

А. Стадія пробопідготовки:
1. Розчинення у воді (для ЛХ, добре розчинних у воді) або
у суміші з органічними розчинниками (ацетон, діоксан);
2. «Мокра» мінералізація (для органічних речовин) –
2.1. спалювання ЛВ із сумішшю MgSO4 та H2SO4 (Т=800оС).
2.2. мінералізація сумішшю H2SO4 та HNO3 (нагрівання до
200оC).
2.3. мінералізація з використанням НВЧ-нагрівання
(Тефлонові судини, 2,5 ГГц).
3. "Суха" мінералізація - сплавлення з MgO (Т = 600оС).
Б. Якісний та/або напівкількісний аналіз
(хімічна реакція з сульфід-іоном):
1. Якісний - безеталонний (відсутність забарвлення з
реагентом)
2. Напівкількісний аналіз - порівняння забарвлення з еталоном,
що містить граничну кількість іонів свинцю (еталону).
66
В. Кількісний аналіз – метод ААС чи АЕС.

67. Залишкові органічні розчинники (класифікація)

В основі класифікації лежить потенційна
небезпека розчинників для організму людини та
довкілля.
Клас 1. Розчинники, використання яких
слід уникати (канцерогенні речовини та
супертоксіканти навколишнього середовища - бензол, ТХУ,
1,2-дихлоретан, 1,1-дихлоретен, 1,1,1-трихлоретан).
Клас 2. Розчинники, використання яких
слід обмежувати (негенотоксичні
канцерогени, речовини із суттєвою
токсичністю) - ацетонітрил, гексан, діоксан,
ксилол, метанол, нітрометан, піридин, хлороформ,
толуол, етілеггліколь та ін.
67

68. Залишкові органічні розчинники (класифікація, продовження)

Клас 3. Малотоксичні розчинники (з
низьким потенціалом токсичності у людини,
не вимагають встановлення граничних
вмісту – менше 5000 ppm (мкг/г) або
0,5%) - ацетон, бутанол-1, бутанол-2, гептан,
ДМСО, пентан, оцтова кислота, пропанол-1,
пропанол-2, етанол, ТГФ, пентан та ін.
Клас 4. Розчинники, для яких
відсутні необхідні дані про
токсичності (ізооктан, петролейний ефір,
трифтороцтова кислота та ін.).
68

69. Залишкові органічні розчинники

Метод газової хроматографії (ГХскринінг)
А. Підготовка зразка та розчину
порівняння
1. Розчинення наважки випробуваного зразка
у воді (для ЛХ, розчинних у воді).
2. Розчинення наважки випробуваного зразка
у диметилформаміді (ДМФА).
3. Розчинення наважки випробуваного зразка
в 1,3-диметил-2-імідазолідіноне.
Оскільки більшість органічних розчинників
«включені» в кристалічні ґрати (або в
структуру у вигляді сольватів) ЛВ, пробопідготовка
повинна включати повне розчинення зразка з
«руйнуванням» решітки та можливих сольватів.
CH3
H
N
CH3
O
CH3
N
O
N
CH3
69

70. Залишкові органічні розчинники (аналіз)

Б. Парофазова пробопідготовка -
проводиться для перекладу ГЗР з розчину в
парогазову фазу (нагрівання в герметично
закупореному посудині).
В. Газохроматографічний аналіз парогазової фази (напівкількісний аналіз з
поділом на капілярній колонці середньої
полярності).
70

71. Специфічні домішки

1. Напівпродукти синтезу та специфічні реагенти
(включаючи каталізатори)
1.1. Неорганічні речовини – катіони, аніони,
комплексні з'єднання
1.2. Органічні речовини
1.3. Генетично-модифіковані мікроорганізми,
віруси та ін.
O
N
N
HN
N
N
N
CH3
Ірбесартан (домішка азид-іона)
71

72. Специфічні домішки

Найбільша група домішок в органічних ЛХ –
родинні за хімічною структурою хімічні
речовини (число їх обмежено поки що тільки
можливостями методів поділу та детекції). Чим
складніше хім. структура – ​​тим більша кількість
домішок необхідно нормувати.
O
H3C
H3C
CH3
O
H
H
CH3
H
O
H
H3C
O
O
CH3
O
H
H
S
O
H
O
S
H
H
Br
O
H
CH3
O
CH3
H
O
S
H
O
O
H3C
CH3
CH3
Спіронолактон
H3C
O
H
H
O
CH3
H3C
O
CH3
H
H
H
O
O
H
H
H
H
O
72
O

73. Специфічні домішки

OH
OH
O
Парацетамол
O2N
H3C
N
H
OH
HO
H2N
O
Побічні
продукти
синтезу
Cl
H3C
O
N
H
OH
O
H3C
H3C
N
H
Проміжні
продукти
синтезу
N
H
Cl
OH
O
H3C
N
H
73

74. Специфічні домішки

Супутні домішки в ЛВ природного
походження:
А. хімічно споріднені аналоги
(мають біологічну (фармакологічну)
активністю, можуть бути потенційно небезпечні
для організму)
Б. залишкові кількості пестицидів і
супертоксикантів (поліхлордіоксини,
поліхлорбіфеніли), продукти
життєдіяльності мікроорганізмів
(афлатоксини) – безумовні токсичні
речовини, що жорстко нормуються на рівні ppm і
ppb (мкг/г чи нг/г)
74

75. Супутні домішки ЛВ природного походження (приклад)

OH
O
OH
OH
O
H
H
H
HO
H
OH
H
OH
cholic acid
H
HO
O
H
OH
ursodeoxycholic acid
H
Урсодезоксіхолева кислота
(Виділяється з ведмежої жовчі)
H
H
OH
OH
chenodeoxycholic acid
75

76. Специфічні домішки

Продукти розкладання та взаємодії:
1. з технологічними домішками (важкими металами
(d-елементи є каталізаторами багатьох ОВреакцій, у тому числі за участю O2), іонами заліза,
залишками реагентів з реакціоноздатними
функціональними групами),
2. з вологою (можливі реакції гідролізу (складні
ефіри, аміди, карбамати та ін.), поглинання вологи
завжди пов'язано зі зменшенням вмісту активного
речовини),
3. з киснем повітря (киснечутливі
речовини, наприклад, поліненасичені жирні
кислоти, сильні відновники),
4. із залишковими органічними розчинниками (ряд
органічних розчинників - етиленоксид, дихлорметан,
дихлоретан, оцтова кислота та ін.
реакціоноспроможні та реагують з ЛХ при зберіганні).
76

77. Стресові випробування -

Стресові випробування Випробування стійкості ЛВ під
впливом низки факторів
(температура, реагенти, освітлення) з
метою доказу селективності
методів оцінки домішок, вивчення
освіти та ідентифікації
домішок, додаткового вивчення
стабільності ЛВ під час зберігання.
77

78. Стресові випробування (умови)

1. Температура – ​​послідовне
підвищення температури при зберіганні
зразка ЛХ на 10оС (50, 60 і т.д.);
2. Вологість (підвищення відн. вологості
повітря при зберіганні зразка ЛХ до 75% та
вище).
3. Реагенти – розчини кислот (1М HCl),
лугів (1М або 0,1М NaOH), H2O2 (3-30%)
під час нагрівання.
4. Вплив світла (УФ-світло,
інтенсивність – не менше 200 Вт.ч/м2)
78

79. Кількісне визначення

Методи аналізу (класифікація,
коротка характеристика, застосування
для аналізу ЛВ та ЛЗ, порівняльна
оцінка) - це тема наступних як
щонайменше 3 лекцій!
Дякую за увагу!

Муніципальна бюджетна освітня установа

«Школа №129»

Автозаводського району м. Нижнього Новгорода

Наукове суспільство учнів

Аналіз лікарських засобів.

Виконала: Тяпкіна Вікторія

учениця 10 А класу

Наукові керівники:

Новик І.Р. доцент кафедри хімії та хімічної освіти НДПУ ім. К. Мініна; к.п.н.;

Сидорова А.В . вчитель хімії

МБОУ «Школа №129».

Нижній Новгород

2016 р.

Зміст

Введение……………………………………………………………………….3

Глава 1. Відомості про лікарські речовини

1. Історія застосування лікарських речовин………………………….5

   Класифікація лікарських препаратів…………………………….8

   Склад та фізичні властивості лікарських речовин……………….11

   Фізіологічні та фармакологічні властивості лікарських речовин…………………………………………………………………….16

   Висновки до 1 главі………………………………………………………….19

Глава 2. Дослідження якості лікарських засобів

2.1. Якість лікарських препаратів……………………………………21

2.2. Аналіз лікарських препаратів……………………………………...25

Заключение…………………………………………………………………….31

Бібліографічний список…………………………………………………..32

Вступ

Ліки твоє в тобі самому, але ти цього не відчуваєш, а хвороба твоя через тебе самого, але ти цього не бачиш. Думаєш, що ти – це маленьке тіло, адже в тобі приховується величезний світ».

Алі ібн Абу Таліб

Лікарська речовина - індивідуальна хімічна сполука або біологічна речовина, що має лікувальні або профілактичні властивості.

Людство використовує ліки ще з давніх часів. Так, у Китаї за 3000 років до н.е. як ліки використовували речовини рослинного, тваринного походження, мінерали. В Індії написано медичну книгу «Аюверда» (6-5 століття до н. е.), в якій даються відомості про лікарські рослини. Давньогрецький лікар Гіппократ (460-377 рр. до н.е.) у своїй медичній практиці використав понад 230 лікарських рослин.

В епоху Середньовіччя багато лікарських засобів було відкрито та впроваджено в медичну практику завдяки алхімії. У 19 столітті внаслідок загального прогресу природничих наук арсенал лікарських речовин значно розширився. З'явилися лікарські речовини, одержані шляхом хімічного синтезу (хлороформ, фенол, саліцилова кислота, ацетилсаліцилова кислота та ін.).

У 19 столітті починає розвиватись хіміко-фармацевтична промисловість, що забезпечує масовий випуск лікарських засобів. Лікарські засоби – це речовини або суміші речовин, які застосовуються для профілактики, діагностики, лікування захворювань, а також для регуляції інших станів. Сучасні лікарські засоби розробляються у фармацевтичних лабораторіях на основі рослинної, мінеральної та тваринної сировини, а також продуктів хімічного синтезу. Лікарські засоби проходять лабораторні клінічні випробування і лише після цього застосовують у медичній практиці.

В даний час створюється величезна кількість лікарських речовин, але також багато підробки. За даними Всесвітньої організації охорони здоров'я (ВООЗ), найбільший відсоток підробок посідає антибіотики - 42%. У нашій країні, за інформацією МОЗ, фальсифіковані антибіотики становлять сьогодні 47% від загальної кількості препаратів – підробок, гормональні засоби-1%, протигрибкові засоби, анальгетики та препарати, що впливають на функцію шлунково-кишкового тракту –7%.

Тема якості лікарських препаратів завжди буде актуальною, оскільки від споживання цих речовин залежить наше здоров'я, тому для подальших досліджень ми взяли саме ці речовини.

Мета дослідження: познайомитись із властивостями лікарських препаратів та встановити їх якість за допомогою хімічного аналізу.

Об'єкт дослідження: препарат анальгіну, аспірину (ацетилсаліцилової кислоти), парацетамолу.

Предмет дослідження: якісний склад препаратів

Завдання:

Вивчити літературу (наукову та медичну) з метою встановлення складу досліджуваних лікарських речовин, їх класифікації, хімічних, фізичних та фармацевтичних властивостей.

Підібрати методику, яка підходить для встановлення якості вибраних лікарських препаратів в аналітичній лабораторії.

Провести дослідження якості лікарських засобів за обраною методикою якісного аналізу.

Проаналізувати результати, обробити їх та оформити роботу.

Гіпотеза: Провівши аналіз якості лікарських препаратів за обраними методиками можна визначити якість справжності препаратів і зробити необхідні висновки.

Глава 1. Відомості про лікарські речовини

1. Історія застосування лікарських речовин

Вчення про ліки є однією з найдавніших медичних дисциплін. Очевидно, лікарська терапія у примітивної формі існувала вже у первісному людському суспільстві. Вживаючи в їжу ті чи інші рослини, спостерігаючи за тваринами, що поїдають рослини, людина поступово знайомилася з властивостями рослин, у тому числі з їх лікувальною дією. Про те, що перші ліки були в основному рослинного походження, ми можемо судити з найдавніших зразків писемності, що дійшли до нас. В одному з єгипетських папірусів (XVII століття до н. Е..) Описується ряд рослинних лікарських засобів; деякі з них застосовуються і в даний час (наприклад, олія рицинова та ін).

Відомо, що в Стародавню ГреціюГіппократ (ІІІ століття до н. е.) використовував для лікування захворювань різні лікарські рослини. При цьому він рекомендував користуватися цілими, необробленими рослинами, вважаючи, що тільки в цьому випадку вони зберігають свою цілющу силу. У ІІ столітті зв. е. Римський лікар Клавдій Гален широко застосовував різні витяги з лікарських рослин. Для вилучення діючих початків із рослин він використовував вина, оцти. Спиртові витяжки з лікарських рослин застосовують і нині. Це настоянки та екстракти. На згадку про Галену настоянки та екстракти відносять до так званих галенових препаратів.

Велика кількість лікарських засобів рослинного походження згадується у творах найбільшого таджицького медика епохи Середньовіччя Абу Алі Ібн-Сіни (Авіценни), який жив у XI столітті. Деякі з цих засобів використовуються і в даний час: камфора, препарати блекоти, ревеню, олександрійського листа, ріжків та ін. Крім ліків рослинного походження, медики застосовували деякі неорганічні лікарські речовини. Вперше речовини неорганічної природи став широко використовувати у медичній практиці Парацельс (XV-XVI століття). Він народився і здобув освіту у Швейцарії, був професором у Базелі, а потім переселився до Зальцбурга. Парацельс ввів у медицину багато лікарських засобів неорганічного походження: сполуки заліза, ртуті, свинцю, міді, миш'яку, сірки, сурми. Препарати зазначених елементів призначали хворим у великих дозах, і часто одночасно з лікувальним ефектом вони виявляли токсичну дію: викликали блювоту, пронос, слинотечу тощо. Це, однак, цілком відповідало уявленням того часу про лікарську терапію. Слід зазначити, що в медицині довго утримувалося уявлення про хворобу як про те, що щось увійшло в організм хворого ззовні. Для «вигнання» хвороби призначали речовини, що викликають блювання, пронос, слинотечу, рясне потовиділення, застосовували масивні кровопускання. Одним із перших медиків, які відмовилися від лікування масивними дозами ліків, був Ганеман (1755-1843). Він народився і отримав медичну освіту в Німеччині, а потім працював лікарем у Відні. Ганеман звернув увагу на те, що хворі, які отримували ліки у великих дозах, одужують рідше, ніж хворі, які такого лікування не отримували, тому він запропонував різко зменшити дозування ліків. Не маючи при цьому жодних фактичних даних, Ганеман стверджував, що терапевтична дія ліків збільшується із зменшенням дози. Дотримуючись цього принципу, він призначав хворим на лікарські засоби в дуже малих дозах. Як показує експериментальна перевірка, у цих випадках речовини не мають жодної фармакологічної дії. Згідно з іншим принципом, проголошеним Ганеманом і також абсолютно необґрунтованим, будь-яка лікарська речовина викликає «лікарську хворобу». Якщо «лікарська хвороба» подібна до «натуральної хвороби», вона витісняє останню. Вчення Ганемана отримало назву «гомеопатія» (homoios - однаковий; pathos - страждання, тобто лікування подібного до подібних), а послідовники Ганемана стали називатися гомеопатами. За період з часу Ганемана період гомеопатія мало змінилася. Принципи гомеопатичного лікування не обґрунтовані експериментально. Перевірки гомеопатичного методу лікування у клініці, які проводяться за участю гомеопатів, не показали його суттєвого терапевтичного ефекту.

Виникнення наукової фармакології відноситься до XIX століття, коли з рослин вперше були виділені окремі діючі початки в чистому вигляді, отримані перші синтетичні сполуки і коли завдяки розвитку експериментальних методів стало можливим експериментальне вивчення фармакологічних властивостей лікарських речовин. У 1806 р. з опію було виділено морфін. У 1818 р. виділено стрихнін, у 1820 р. - кофеїн, у 1832 р. - атропін, у наступні роки - папаверин, пілокарпін, кокаїн та ін. Всього до кінця XIX століття було виділено близько 30 подібних речовин (алкалоїдів рослин). Виділення чистих діючих початків рослин в ізольованому вигляді дозволило точно визначити їх властивості. Цьому сприяла поява експериментальних методів дослідження.

Перші фармакологічні експерименти було проведено фізіологами. У 1819 р. відомий французький фізіолог Ф. Мажанді вперше досліджував на жабі дію стрихніну. У 1856 р. інший французький фізіолог Клод Бернар провів на жабі аналіз дії кураре. Майже одночасно і незалежно від Клода Бернара аналогічні експерименти були проведені в Петербурзі відомим російським судовим медиком та фармакологом Є. В. Пеліканом.

1.2. Класифікація лікувальних препаратів

Бурхливий розвиток фармацевтичної промисловості призвів до створення величезної кількості лікарських засобів (нині сотні тисяч). Навіть у спеціальній літературі з'являються такі вирази, як "лавина" лікарських препаратів або "лікарські джунглі". Природно, що склалася ситуація дуже ускладнює вивчення лікарських засобів та їхнє раціональне застосування. Виникає гостра необхідність у розробці класифікації лікарських засобів, яка б допомогла лікарям орієнтуватися в масі препаратів і вибирати оптимальний для хворого засіб.

Лікарський препарат – фармакологічний засіб, дозволений уповноваженим на те органом відповідної країни.у встановленому порядку для застосування з метою лікування, попередження чи діагностики захворювання у людини чи тварини.

Лікарські засоби можна класифікувати за такими принципами:

– терапевтичне застосування (протипухлинні, антиангінальні, протимікробні засоби);

– фармакологічні засоби(вазодилатори, антикоагументи, діуретики);

– хімічні сполуки (алкалоїди, стероїди, глікоїди, бензодіазеніни).

Класифікація лікарських засобів:

I. Кошти, які діють ЦНС (центральну нервову систему).

1 . Кошти для наркозу;

2. Снодійні засоби;

3. Психотропні препарати;

4. Протисудомні (протиепілептичні засоби);

5. Засоби на лікування паркінсонізму;

6. Аналгезуючі засоби та нестероїдні протизапальні препарати;

7. Блювотні та протиблювотні препарати.

ІІ.Лікарські засоби, що діють на периферичну СР (нервову систему).

1. Кошти, що діють на периферичні холінергічні процеси;

2. Кошти, що діють на периферичні адренергічні процеси;

3. Дофалін та дофамінеричні препарати;

4. Гістамін та антигістамінні препарати;

5. Серотинін, серотоніноподібні та антисеротонінові препарати.

III. Засоби, що діють переважно у ділянці чутливих нервових закінчень.

1. Місцевоанестезуючі препарати;

2. Обвалювальні та адсорбуючі засоби;

3. В'яжучі засоби;

4. Засоби, дія яких пов'язана переважно з подразненням нервових закінчень слизових оболонок та шкіри;

5. Відхаркувальні засоби;

6. Проносні засоби.

IV. Кошти, що діють на ССС (серцево-судинну систему).

1. Серцеві глікозиди;

2. Антиаритмічні препарати;

3. Судинорозширювальні та спазмолітичні засоби;

4. Антиангінальні препарати;

5. Препарати, що покращують мозковий кровообіг;

6. Антигіпертензивні засоби;

7. Спазмолітичні засоби різних груп;

8. Речовини, що впливають на ангіотензинову систему.

V. Кошти, що посилюють функцію виділення нирок.

1. діуретичні засоби;

2. Засоби, що сприяють виведенню сечової кислоти та видаленню сечових конкрементів.

VI. Жовчогінні засоби.

VII. Засоби, що впливають на м'яз матки (маткові засоби).

1. Кошти, що стимулюють мускулатуру матки;

2. Кошти, що розслабляють мускулатуру матки (токолітики).

VIII. Кошти, що впливають процеси обміну речовин.

1. Гормони, їх аналоги та антигормональні препарати;

2. Вітаміни та їх аналоги;

3. Ферментні препарати та речовини з антиферментною активністю;

4. Кошти, що впливають на згортання крові;

5. Препарати гіпохолестеринемічної та гіполіпопротеїнемічної дії;

6. Амінокислоти;

7. Плазмозамінні розчини та засоби для парентерального живлення;

8. Препарати, які застосовуються для корекції кислотно-лужної та іонної рівноваги в організмі;

9. Різні препарати, що стимулюють метаболічні процеси.

IX. Лікарські препарати, що модулюють процеси імунітету ("імуномодулятори").

1. Препарати, що стимулюють імунологічні процеси;

2. Імунодепресивні препарати (імуносупресори).

X. Препарати різних фармакологічних груп.

1. Анорексигенні речовини (речовини, що пригнічують апетит);

2. Специфічні антидоти, комплексони;

3. Препарати для профілактики та лікування синдрому променевої хвороби;

4. Фотосенсибілізуючі препарати;

5. Спеціальні засоби лікування алкоголізму.

1. Хімотерапевтичні засоби;

2. Антисептичні засоби.

XII. Препарати для лікування злоякісних новоутворень.

1. Хімотерапевтичні засоби.

2. Ферментні препарати, які застосовуються для лікування онкологічних захворювань;

3. Гормональні препаратита інгібітори утворення гормонів, що застосовуються переважно для лікування пухлин.

1. Склад та фізичні властивості лікарських речовин

У роботі ми вирішили дослідити властивості лікарських речовин, що входять до складу найчастіше застосовуваних лікарських препаратів і є обов'язковими до будь-якої домашньої аптечки.

Анальгін

У перекладі слово "анальгін" означає відсутність болю. Важко знайти людину, яка не приймала анальгін. Анальгін – головний препарат у групі ненаркотичних аналгетиків – препаратів, здатних зменшувати біль без впливу на психіку. Зменшення болю – не єдиний фармакологічний ефект анальгіну. Здатність зменшувати вираженість запальних процесів і здатність знижувати підвищену температуру тіла - не менш цінні (жарознижувальний та протизапальний ефект). Тим не менш, анальгін рідко використовують з протизапальною метою, для цього є набагато ефективніші засоби. А ось при лихоманці і болю він саме в самий раз.

Метамізол (анальгін) протягом багатьох десятиліть був у нашій країні препаратом швидкої допомоги, а не засобом лікування хронічних захворювань. Таким він і має залишатися.

Анальгін синтезований у 1920 р. у пошуках легко розчинної форми амідопірину. Це третій основний напрямок у розробці болезаспокійливих засобів. Анальгін, як стверджує статистика, один із найулюбленіших препаратів, а головне – всім доступний. Хоча насправді йому зовсім небагато років – лише близько 80. Анальгін фахівці розробили спеціально, щоб боротися із сильним болем. І справді, чимало людей він позбавив мук. Застосовувався він як доступний знеболюючий засіб, оскільки широкого асортименту засобів проти болю на той час не було. Звичайно, використовувалися наркотичні анальгетики, але медицина того часу вже мала достатні дані про , і ця група засобів застосовувалася тільки у відповідних випадках. Препарат Анальгін має велику популярність у медичній практиці. Вже одна назва говорить про те, що Анальгін від чого допомагає і в яких випадках застосовується. Адже у перекладі воно означає "відсутність болю". Анальгін належить до групи безнаркотичних анальгетиків, тобто. препаратів, здатних зменшувати біль без впливу психіку.

У клінічну практику анальгін (метамізол натрію) був уперше впроваджений у Німеччині 1922 року. Анальгін став незамінним для шпиталів Німеччини під час Другої світової війни. Протягом багатьох років він залишався дуже популярним лікарським засобом, але ця популярність мала і зворотний бік: широке та практично безконтрольне його застосування як безрецептурного препарату призвело до 70-х років. минулого століття до смертельних наслідків від агранулоцитозу (імунне захворювання крові) та шоку. Це призвело до того, що анальгін був заборонений у низці країн, тоді як в інших він залишався доступним як безрецептурний засіб. Ризик серйозних побічних ефектів при використанні комбінованих препаратів, що містять метамізол, є вищим, ніж при прийомі "чистого" анальгіну. Тому в більшості країн такі кошти були вилучені з обігу.

Торгове найменування: а нальгін.
Міжнародне найменування: Метамізол натрій (Metamizole sodium).
Групова приналежність: Аналгетичний ненаркотичний засіб.
Лікарська форма: капсули, розчин для внутрішньовенного та внутрішньом'язового введення, супозиторії ректальні [для дітей], таблетки, таблетки [для дітей].

Хімічний склад та фізико-хімічні властивості анальгіну

Анальгін. Analginum.

Метамізол натрій.

Хімічна назва: 1-феніл-2,3-диметил-4-метил-амінопіразолон-5-N-метан - сульфат натрію

Брутто-формула: C 13 H 18 N 3 NaO 5 S

Рис.1

Зовнішній вигляд: безбарвні голчасті кристали гіркого смаку без запаху.

Парацетамол

У 1877 році Хармон Норзроп Морз синтезував парацетамол в Університеті Джонса Хопкінса в реакції відновлення р-нітрофенолу оловом у крижаній оцтовій кислоті, але тільки в 1887 клінічний фармаколог Джозеф фон Мерінг випробував парацетамол на пацієнтах. У 1893 році фон Мерінг опублікував статтю, де повідомлялося про результати клінічного застосування парацетамолу та фенацетину, іншого похідного аніліну. Фон Мерінг стверджував, що, на відміну від фенацетину, парацетамол має деяку здатність викликати метгемоглобінемію. Парацетамол потім був швидко відкинутий на користь фенацетину. Продаж фенацетину почала Bayer як лідируюча на той час фармацевтична компанія. Впроваджений в медицину Генріхом Дрезером в 1899 році, фенацетин був популярний протягом багатьох десятиліть, особливо в безрецептурній «мікстурі від головного болю», що широко рекламується, зазвичай містить фенацетин, амінопіринове похідне аспірину, кофеїн, а іноді і барбітура.

Торгова назва:Парацетамол

Міжнародна назва: парацетамол

Групова приналежність: аналгетичний ненаркотичний засіб.

Лікарська форма:таблетки

Хімічний склад та фізико-хімічні властивості парацетамолу

Парацетамол. Paracetamolum.

Брутто – формула:C 8 H 9 NO 2 ,

Хімічна назва: N-(4-гідроксифеніл) ацетамід.

Зовнішній вигляд: білий або білий з кремовим або Рис.2 рожевим відтінком кристалічний порошок. Легкооенш679к969розчинний у спирті, нерозчинний у воді.

Аспірин (ацетисаліцилова кислота)

Аспірин вперше був синтезований у 1869 році. Це один з найвідоміших препаратів, що широко використовуються. Виявилося, що історія аспірину є типовою для багатьох інших ліків. Ще в 400 році до нашої ери грецький лікар Гіппократ рекомендував пацієнтам для позбавлення від болю жувати вербову кору. Він, звичайно, не міг знати про хімічний склад знеболювальних компонентів, проте це були похідні ацетилсаліцилової кислоти (хіміки з'ясували це лише через два тисячоліття пізніше). У 1890 р. Ф. Хоффман, який працював у німецькій фірмі «Байєр», розробив метод синтезу ацетилсаліцилової кислоти – основи аспірину. На ринок аспірин був випущений в 1899, а з 1915 став продаватися без рецептів. Механізм знеболювальної дії був відкритий лише в 1970-их роках. Останні роки аспірин став засобом для профілактики серцево-судинних захворювань.

Торгова назва : Аспірин.

Міжнародна назва : ацетилсаліцилова кислота.

Групова приналежність : нестероїдний протизапальний препарат.

Лікарська форма: таблетки.

Хімічний склад та фізико-хімічні властивості аспірину

Ацетилсаліцилова кислота.Acidum acetylsalicylicum

Брутто – формула: З 9 Н 8 Про 4

Хімічна назва: 2-ацетоксі-бензойна кислота.

Зовнішній вигляд : годбіла кристалічна порошок, що майже не володієсловникзапах, кислий на смак.

Дібазол

Дибазол створювався у Радянському Союзі ще у середині минулого століття. Вперше ця речовина була відзначена в 1946 р. як найбільш активна у фізіологічному плані сіль Бензімідазолу. У ході дослідів на лабораторних тварин була помічена здатність нової речовини покращувати передачу нервових імпульсів у спинному мозку. Ця здатність підтвердилася під час клінічних випробувань, і препарат на початку 50-х р. був впроваджений у клінічну практику для лікування захворювань спинного мозку, зокрема – поліомієліту. Зараз використовується як засіб для зміцнення імунітету, поліпшення метаболізму та підвищення витривалості.

Торгова назва: Дибазол.

Міжнародна назва :Дібазол. Друге: Бензилбензімідазолу гідрохлорид.

Групова приналежність : препарат групи периферичних вазодилататорів.

Лікарська форма : розчин для внутрішньовенного та внутрішньом'язового введення, супозиторії ректальні [для дітей], таблетки.

Хімічний склад та фізико-хімічні властивості: Дібазол

Добре розчиняється у воді, але погано розчиняється у спирті.

Брутто-формула : C 14 H 12 N 2 .

Хімічна назва : 2-(Фенілметил)-1Н-бензімідазол.

Зовнішній вигляд : похідне Бензімідазолу,

Рис.4 являє собою білий, біло-жовтийабо

світло-сірий кристалічний порошок.

1. Фізіологічна та фармакологічна дія лікарських препаратів

Анальгін.

Фармакологічні властивості:

Анальгін відноситься до групи нестероїдних протизапальних препаратів, ефективність якого обумовлена ​​активністю метамізолу натрію, який:

Блокує проходження больових імпульсів по пучках Голля та Бурдаха;

Значно підвищує тепловіддачу, що зумовлює доцільність використання за високої температури Анальгіна;

Сприяє збільшенню порога збудливості таламічних центрів больової чутливості;

Чинить слабко виражену протизапальну дію;

Сприяє деякому спазмолітичному ефекту.

Активність Анальгін розвивається приблизно через 20 хвилин після прийому, досягаючи максимуму через 2 години.

Показання до застосування

Згідно з інструкцією,Анальгін застосовується для усунення больового синдрому, що провокується такими захворюваннями, як:

Артралгія;

Кишкова, жовчна та ниркова колька;

Опіки та травми;

Оперезуючий лишай;

Невралгія;

Декомпресійна хвороба;

Міалгія;

Альгодисменорея та ін.

Ефективним є використання Анальгіну для усунення зубного та головного болю, а також післяопераційного больового синдрому. Крім того, препарат застосовується при пропасному синдромі, викликаному укусами комах, інфекційно-запальними захворюваннями або посттрансфузійними ускладненнями.

Для усунення запального процесу та зниження температури Анальгін застосовується рідко, тому що для цього існують ефективніші засоби.

Парацетамол

Фармакологічні властивості:

парацетамол швидко та майже повністю абсорбується із шлунково-кишкового тракту. Зв'язується із білками плазми на 15 %. Парацетамол проникає через гематоенцефалічний бар'єр. Менше 1% від прийнятої матері-годувальниці дози парацетамолу проникає в грудне молоко. Парацетамол піддається метаболізму в печінці та виділяється із сечею, головним чином, у вигляді глюкуронідів та сульфованих кон'югатів, менше 5 % виділяється у незмінному вигляді із сечею.

Показання до застосування

для швидкого полегшення головного болю, включаючи мігренозний біль;

зубний біль;

невралгії;

м'язового та ревматичного болю;

а також при альгодисменореях, болю при травмах, опіках;

для зниження підвищеної температури при застудних захворюваннях та грипі.

Аспірин

Фармакологічні властивості:

Ацетилсаліцилова кислота (АСК) має знеболювальну, жарознижувальну та протизапальну дію, що обумовлено інгібуванням ензимів циклоксигеназ, що беруть участь у синтезі простагландинів.

АСК в діапазоні доз від 0,3 до 1,0 г застосовується для зниження температури при таких захворюваннях, як застуда та, і для полегшення суглобових та м'язових болів.
АСК пригнічує агрегацію тромбоцитів, блокуючи синтез тромбоксану А 2 у тромбоцитах.

Показання до застосування

для симптоматичного полегшення головного болю;

зубний біль;

біль у горлі;

болі в м'язах та суглобах;

біль у спині;

підвищена температура тіла при простудних та інших інфекційно-запальних захворюваннях (у дорослих та дітей старше 15 років)

Дібазол

Фармакологічні властивості

Вазодилатуючий засіб; має гіпотензивну, судинорозширювальну дію, стимулює функцію спинного мозку, має помірну імуностимулюючу активність. Має безпосередню спазмолітичну дію на гладкі м'язи кровоносних судин та внутрішніх органів. Полегшує синаптичну передачу у спинному мозку. Викликає розширення (нетривале) мозкових судин і тому особливо показано при формах артеріальної гіпертензії, зумовлених хронічною гіпоксією мозку через місцеві порушення кровообігу (склероз церебральних артерій). У печінці дибазол піддається метаболічним перетворенням шляхом метилювання та карбоксиетилування з утворенням двох метаболітів. Переважно виводиться нирками, і меншою мірою – через кишечник.

Показання до застосування

Різні стани, що супроводжуються артеріальною гіпертензією, зокрема. та гіпертонічна хвороба, гіпертонічні кризи;

Спазм гладкої мускулатури внутрішніх органів (кишкова, печінкова, ниркова колька);

Залишкові явища поліомієліту, параліч лицьового нерва, поліневрити;

Профілактика вірусних інфекційних захворювань;

Підвищення стійкості організму до зовнішніх несприятливих впливів.

1. Висновки до розділу 1

1) Виявлено, що вчення про ліки є однією з найдавніших медичних дисциплін. Лікарська терапія у найпримітивнішій формі існувала вже в первісному людському суспільстві. Перші ліки були переважно рослинного походження. Виникнення наукової фармакології відноситься до XIX століття, коли з рослин вперше були виділені окремі діючі початки в чистому вигляді, отримані перші синтетичні сполуки і коли завдяки розвитку експериментальних методів стало можливим експериментальне вивчення фармакологічних властивостей лікарських речовин.

2) Встановлено, що лікарські засоби можна класифікувати за такими принципами:

– терапевтичне застосування;

–фармакологічні засоби;

– хімічні сполуки.

3) Розглянуто хімічний складта фізичні властивості препаратів анальгіну, парацетамолу та аспірину, які є незамінними у домашній аптечці. Встановлено, що лікарські речовини даних препаратів є складними похідними ароматичних вуглеводнів та амінів.

4) Показано фармакологічні властивості досліджуваних препаратів, а також показання до їх застосування та фізіологічну дію на організм. Найчастіше дані лікарські речовини використовуються як жарознижувальні та болезаспокійливі.

Глава 2. Практична частина. Дослідження якості лікарських засобів

2.1. Якість лікарських препаратів

У визначенні Всесвітньої організації охорони здоров'я під фальсифікованим (контрафактним) лікарським засобом (ФЛС) мається на увазі продукт, навмисно та протиправно з етикеткою, що неправильно вказує справжність препарату та (або) виробника.

Поняття «фальсифікат», «контрафакт» і «підробка» юридично мають певні відмінності, але для звичайного громадянина вони ідентичні. . Контрафактним вважається лікарський засіб, виробництво та подальший продаж якого здійснюється під чужими індивідуальними ознаками (товарним знаком, найменуванням чи місцем походження) без дозволу патентоутримувача, що є порушенням прав інтелектуальної власності.

Фальсифікований лікарський засіб часто розцінюється як підроблений та контрафактний. У Російської Федераціїфальсифікованим вважається лікарський засіб, який визнається таким Росздравнаглядом після ретельної перевірки з опублікуванням відповідної інформації на сайті Росздравнагляду. З дня публікації звернення ФЛС має бути припинено з вилученням із торгової мережі та приміщенням в карантинну зону окремо від інших ліків. Переміщення цього ФЛС є порушенням.

Фальсифікація ліків вважається четвертим злом охорони здоров'я після малярії, СНІДу та куріння. У своїй більшості фальсифікати не відповідають за якістю, ефективністю або побічним діяморигінальним препаратам, завдаючи непоправної шкоди здоров'ю хворої людини; виробляються та поширюються без контролю відповідних органів, завдаючи величезної фінансової шкоди законним виробникам ліків та державі. Смерть від ФЛС входить до першої десятки причин загибелі людей.

Фахівці виділяють чотири основні типи підроблених ліків.

1-й тип - «ліки-пустушки». У цих «ліках» зазвичай відсутні основні лікувальні компоненти. Ті, хто приймає їх, не відчувають різниці і навіть на низку пацієнтів прийом «пустушок» може за рахунок плацебо-ефекту надавати позитивний вплив.

2-й тип - «ліки-імітатори». У таких «ліках» використовуються дешевші та менш ефективні, ніж у справжньому лікарському засобі активні компоненти. Небезпека полягає в недостатній концентрації активних речовин, яких потребують пацієнти.

3-й тип - «Змінені ліки». У цих «ліках» міститься така ж активна речовина, як і в оригінальному засобі, але у більших чи менших кількостях. Природно, застосування таких засобів небезпечно, оскільки може призвести до посилення побічних ефектів (особливо при передозуванні).

4-й тип - «ліки-копії». Вони відносяться до найпоширеніших у Росії типів фальсифікованих коштів (до 90% від загальної кількості підробок), що випускаються зазвичай підпільними виробництвами і тими чи іншими каналами які у партії легальних коштів. Ці препарати містять такі ж активні компоненти, як легальні засоби, але при цьому відсутні гарантії якості субстанцій, що лежать в їх основі, дотримання норм технологічних процесів виробництва та ін. Отже, підвищений ризик наслідків прийому подібних препаратів

Правопорушники притягуються до адміністративної відповідальності, передбаченої ст. 14.1 КоАП РФ, або до кримінальної, відповідальність за яке, у зв'язку з відсутністю в кримінальному кодексі відповідальності за фальсифікацію, настає за декількома складами злочинів і в основному кваліфікується як шахрайство (ст. 159 КК РФ) та незаконне використання товарного знака (ст. 180 КК РФ).

Федеральний закон «Про лікарські засоби» дає правову підставу для вилучення та знищення ФЛС як вироблених у Росії і 15ввозимых з-за кордону, і перебувають у зверненні вітчизняному фармринку.

Частина 9 статті 20 встановлює заборону на ввезення на територію Росії лікарських засобів, що є підробками, незаконними копіями або фальсифікованими лікарськими засобами. Митні органи зобов'язані конфіскувати та знищити їх у разі виявлення.

ст. 31, встановлює заборону на продаж лікарських засобів, які стали непридатними, мають термін придатності, що минув, або визнаних фальсифікованими. Вони також підлягають знищенню. МОЗ Росії своїм наказом від 15.12.2002 р. № 382 затвердило Інструкцію про порядок знищення лікарських засобів, що прийшли в непридатність, лікарських засобів зі строком придатності, що закінчився, і лікарських засобів, що є підробками або незаконними копіями. Але в інструкцію досі не внесли зміни відповідно до доповнень до ФЗ «Про лікарські засоби» від 2004 р. про фальсифіковані та недоброякісні лікарські засоби, де тепер дано визначення та зазначено на заборону їх обігу та вилучення з обігу, а також запропоновано державним органам привести нормативні правові акти у відповідність із цим законом.

Росздравнадзор видав лист № 01І-92/06 від 08.02.2006 «Про організацію роботи територіальних Управлінь Росздравнагляду з інформацією про недоброякісні та фальсифіковані лікарські засоби», який суперечить правовим нормам Закону про лікарські засоби та зводить нанівець боротьбу. Закон наказує вилучати з обігу та знищувати фальсифіковані лікарські засоби, а Росздравнагляд (абзац 4 п. 10) пропонує територіальним Управлінням контролювати вилучення з обігу та знищення фальсифікованих лікарських засобів. Пропонуючи 16 здійснювати контроль тільки за поверненням власнику або власнику для подальшого знищення, Росздравнагляд дозволяє продовжити обіг фальсифікованих лікарських засобів та повернути їх власнику, тобто самому злочинцю-фальсифікатору, що грубо порушує Закон та Інструкцію зі знищення. У цьому часто йдуть посилання Федеральний закон від 27.12.2002 р. № 184-ФЗ «Про технічне регулювання», в ст. 36-38 якого встановлено порядок повернення виробнику чи продавцю продукції, яка відповідає вимогам технічного регламенту. Однак необхідно мати на увазі, що цей порядок не поширюється на фальсифіковані лікарські засоби, які виробляються без дотримання технічного регламенту, невідомо ким і де.

З 1 січня 2008 р. відповідно до ст. 2 Федерального закону від 18.12.2006 р. № 231-ФЗ «Про введення в дію частини четвертої Цивільного кодексу Російської Федерації» набуло чинності нове законодавство про захист інтелектуальної власності, до об'єктів якої належать кошти індивідуалізації, у тому числі й товарні знаки, допомогою яких виробники лікарських засобів захищають права на свою продукцію. У Четвертій частині Цивільного Кодексу РФ (ч. 4 ст. 1252) дано визначення контрафактним матеріальним носіям результатів інтелектуальної діяльності та засобів індивідуалізації

Фармацевтична галузь Росії сьогодні потребує тотального науково-технічного переозброєння, оскільки її основні фонди зношені. Необхідно впровадження нових стандартів, у тому числі і ГОСТ Р 52249-2004, без яких виробництво високоякісних лікарських засобів не можливе.

2.2. Якість лікарських засобів.

Для аналізу лікарських засобів нами були використані методики визначення наявності в них аміногруп (лігнінова проба) фенольний гідроксил, гетероциклів, карбоксильну групу та інші. (Методики ми взяли з методичних розробок для учнів у медичних коледжах та в Інтернеті).

Реакції із препаратом анальгін.

Визначення розчинності анальгіну.

1 . Розчинили 0,5 таблетки анальгіну (0,25 г) в 5 мл води, а другу половину таблетки в 5 мл етилового спирту.

Рис.5 Зважування препарату Рис.6 Подрібнення препарату

Висновок: анальгін добре розчинився у воді, проте практично не розчинився у спирті.

Визначення наявності групи СН 2 SO 3 Na .

Нагріли 0,25 г препарату (півтаблетки) у 8 мл розведеної соляної кислоти.

Рис.7 Нагрівання препарату

Виявили: спочатку запах сірчистого ангідриду, потім формальдегіду.

Висновок: Ця реакція дозволяє довести, що до складу анальгіну входить група формальдегідсульфонату.

Визначення властивостей хамелеону

1 мл отриманого розчину анальгіну додавали 3-4 краплі 10% розчину хлориду заліза (III). При взаємодії анальгіну з Fe 3+ утворюються продукти окислення,

пофарбовані в синій колір, який потім перетворюється на темно-зелений, а далі помаранчевий, тобто. виявляє властивості хамелеону. Це означає, що препарат є якісним.

Для порівняння ми взяли препарати з різними термінами придатності та виявили за допомогою зазначеної вище методики якість препаратів.

Рис.8 Поява властивості хамелеону

Рис.9 Порівняння зразків препаратів

Висновок: реакція з препаратом пізнішого терміну виробництва протікає за принципом хамелеону, що свідчить про його якість. А препарат більш раннього виробництва не виявив цю властивість, тому слід, що даний препарат використовувати за призначенням не можна.

4.Реакція анальгіну з гідроперитом. («Димова шашка»)

реакція йде відразу по двох місцях: по сульфогрупі та метиламініловому угрупованню. Відповідно, за сульфогрупою може утворюватися сірководень, а також вода та кисень

-SO3 + 2H2O2 = H2S + H2O + 3O2.

Вода, що утворюється, призводить до часткового гідролізу по зв'язку С - N і відщеплюється метиламін, і теж утворюється вода і кисень:

-N(CH3) + H2O2 = H2NCH3 + H2O +1/2 O2

І нарешті стає зрозумілим, що за дим виходить у цій реакції:

Сірководень взаємодіє з метиламіном і виходить гідросульфід метиламонію:

H2NCH3 + H2S = HS.

І завись його дрібних кристаликів у повітрі і створює візуальне відчуття "диму".

Рис. 10 Реакція анальгіну з гідроперитом

Реакції із препаратом парацетамол.

Визначення оцтової кислоти

Рис.11 Нагрівання розчину парацетамолу із соляною кислотою Рис.12 Охолодження суміші

Висновок: запах оцтової кислоти, що з'явився, означає, що даний препарат дійсно є парацетамолом.

Визначення фенолпохідного парацетамолу.

До 1 мл розчину парацетамолу додали кілька крапель 10%-ного розчину хлориду заліза (III).

Рис.13 Поява синього фарбування

Спостерігали: синє фарбування, свідчить про наявність у складі речовини фенолпохідної.

0,05 г речовини закип'ятили з 2 мл розведеної соляної кислоти протягом 1 хвилини та додали 1 краплю розчину дихромату калію.

Рис.14 Кип'ятіння із соляною кислотою Рис.15 Окислення дихроматом калію

Спостерігали: поява синьо-фіолетового фарбування,не переходить у червоне.

Висновок: в ході проведених реакцій було доведено якісний склад препарату парацетамолу, і встановлено, що він є похідним аніліну.

Реакції із препаратом аспірин.

Для проведення досвіду ми використовували таблетки аспірину, виготовлені виробничою фармацевтичною фабрикою «Фармстандарт-Томськхімфарм». Придатний до травня 2016 року.

Визначення розчинності аспірину в етанолі.

Внесли до пробірок по 0,1 г лікарських препаратів та додали 10 мл етанолу. При цьому спостерігали часткову розчинність аспірину. Нагріли на спиртовці пробірки із речовинами. Порівняли розчинність лікарських препаратів у воді та етанолі.

Висновок: Результати експерименту показали, що аспірин краще розчиняється в етанолі, ніж у воді, але випадає в осад у вигляді голчастих кристалів. Томунеприпустимо застосування аспірину разом із етанолом. Слід зробити висновок про неприпустимість застосування ліків, що містять алкоголь спільно з аспірином, а тим більше з алкоголем.

Визначення фенолпохідного в аспірині.

У склянці змішали 0,5 г ацетилсаліцилової кислоти, 5 мл розчину гідроксиду натрію та прокип'ятили суміш протягом 3 хвилин. Реакційну суміш охолодили та підкислили розведеним розчином сірчаної кислоти до випадання білого кристалічного осаду. Відфільтрували осад, частину його перенесли в пробірку, долили до нього 1 мл дистильованої води і додали 2-3 краплі розчину заліза хлориду.

Гідроліз складноефірного зв'язку призводить до утворення фенолпохідного, яке з хлоридом заліза (3) дає фіолетове забарвлення.

Рис.16 Кип'ятіння суміші аспірину Рис.17 Окислення розчином Рис.18 Якісна реакція

з гідроксидом натрію сірчаної кислоти на фенолпохідне

Висновок: при гідролізі аспірину утворюється фенолпохідне, яке дає фіолетове забарвлення.

Фенолпохідна - це дуже небезпечна для здоров'я людини речовина, яка впливає на побічні ефекти на організм людини, при прийомі ацетилсаліцилової кислоти. Тому необхідно суворо дотримуватися інструкцій із застосування (цей факт згадувався ще в 19 столітті).

2.3. Висновки до розділу 2

1) Встановлено, що у час створюється дуже багато лікарських речовин, але й багато підробки. Тема якості лікарських препаратів завжди буде актуальною, оскільки від споживання цих речовин залежить наше здоров'я. Якість лікарських препаратів визначено ГОСТ Р 52249 - 09. У визначенні Всесвітньої організації охорони здоров'я під фальсифікованим (контрафактним) лікарським засобом (ФЛС) мається на увазі продукт, навмисно і протиправно з етикеткою, що неправильно вказує справжність препарату та (або) виробника.

2) Для аналізу лікарських препаратів нами були використані методики визначення наявності в них аміногруп (лігнінова проба) фенольний гідроксил, гетероциклів, карбоксильну групу та інші. (Методики ми взяли з навчально-методичного посібника для студентів хімічних та біологічних спеціальностей).

3) У ході проведеного експерименту було доведено якісний склад препаратів анальгіну, дибазолу, парацетамолу, аспірину та кількісний склад анальгіну. Результати і докладніші висновки наведено у тексті роботи у розділі 2.

Висновок

Метою даного дослідження було ознайомитися з властивостями деяких лікарських речовин та встановити їхню якість за допомогою хімічного аналізу.

Я провела аналіз літературних джерел з метою встановлення складу лікарських речовин, що вивчаються, що входять до складу анальгіну, парацетамолу, аспірину, їх класифікації, хімічних, фізичних і фармацевтичних властивостей. Нами було підібрано методику, яка підходить для встановлення якості обраних лікарських препаратів в аналітичній лабораторії. Проведено дослідження якості лікарських препаратів за обраною методикою якісного аналізу.

На основі зробленої роботи було з'ясовано, що всі лікарські речовини відповідають якості ГОСТ.

Звичайно, неможливо розглянути все різноманіття лікарських засобів, їхню дію на організм, особливості застосування та лікарські форми цих препаратів, які є звичайними хімічними речовинами. Більш детальне знайомство зі світом ліків чекає на тих, хто надалі займатиметься фармакологією та медициною.

Також хочеться додати, що незважаючи на бурхливий розвиток фармакологічної індустрії, вченим досі не вдалося створити жодних ліків без побічних ефектів. Про це треба пам'ятати кожному з нас: тому, відчувши нездужання, ми в першу чергу йдемо до лікаря, потім – в аптеку, і починається процес лікування, який часто виявляється у безсистемному прийомі ліків.

Тому на закінчення хочеться навести рекомендації щодо застосування лікарських препаратів:

Лікарські препарати необхідно правильно зберігати, у спеціальному місці, подалі від джерел світла та тепла, згідно з температурним режимом, який обов'язково вказується виробником (у холодильнику або за кімнатної температури).

Лікарські препарати необхідно зберігати у недоступних для дітей місцях.

В аптечці не повинні залишатися невідомі ліки. Кожна баночка, коробочка чи пакетик мають бути підписані.

Не можна використовувати ліки, якщо вони закінчили термін придатності.

Не приймайте препарати, призначені іншій людині: які добре переносяться одними, вони можуть викликати лікарську хворобу (алергію) в інших.

Строго дотримуйтесь правил прийому препарату: час прийому (до або після їди), дозування та інтервал між прийомами.

Приймайте тільки ті ліки, які вам прописав лікар.

Не поспішайте починати з ліків: іноді достатньо виспатися, відпочити, подихати свіжим повітрям.

Дотримуючись навіть цих небагатьох і нескладних рекомендацій щодо застосування лікарських препаратів, Ви зможете зберегти головне – здоров'я!

Бібліографічний список.

1) Алікберова Л. Ю. Цікава хімія: Книга для учнів, вчителів та батьків. -М.: АСТ-ПРЕС, 2002.

2) Артеменко О.І. Застосування органічних сполук. - М.: Дрофа, 2005.

3) Машковський М.Д. Лікарські засоби. М: Медицина, 2001.

4) Пічугіна Г.В.Хімія та повсякденне життялюдини. М: Дрофа, 2004.

5) Довідник Відаль: Лікарські препарати в Росії: Довідник. - М.: Астра-ФармСервіс. - 2001. - 1536 с.

6) Тутельян В.А. Вітаміни: 99 питань та відповідей.- М.- 2000.- 47 с.

7) Енциклопедія для дітей, тому 17. Хімія. - М. Аванта +, 200.-640с.

8) Регістр лікарських засобів Росії "Енциклопедія ліків". - 9-й вип. - ТОВ М; 2001.

9) Машковський М.Д. Ліки ХХ ст. М: Нова хвиля, 1998, 320 с.;

10) Дайсон Р., Мей П. Хімія синтетичних лікарських речовин. М: Мир, 1964, 660 с.

11) Енциклопедія антибіотиків 9 випуск 2002 року. Лікарські засоби М.Д. Машковський 14 видання.

12) http:// www. consultpharma. ru/ index. php/ ru/ documents/ проізводство/710- gostr-52249-2009- part1? showall=1

УДК 615.015:615.07:53

АНАЛІЗ ЛІКАРСЬКИХ ЗАСОБІВ ПРИ ФАРМАКОКІНЕТИЧНИХ

ДОСЛІДЖЕННЯХ

Дмитро Володимирович Рейхарт1, Віктор Володимирович Чистяков2

Кафедра організації та управління у сфері обігу лікарських засобів (зав. – чл.-кор. РАМН, проф. Р.У. Хабрієв) Московської державної медичної академії ім. І.М. Сєченова,

2 Центр з хімії лікарських засобів - ВНІХФД (ген. директор - К.В. Шилін), м. Москва

Проведено огляд чутливих та специфічних аналітичних методів, що застосовуються щодо фармакокінетики лікарських препаратів. Показано переваги та обмеження застосування імуноферментного аналізу, методу високоефективної рідинної хроматографії з флуоресцентною та мас-спектрометричною детекцією. Застосування того чи іншого методу в оцінці фармакокінетики лікарських засобів у кожному даному випадку визначається структурою досліджуваного з'єднання і оснащеністю лабораторії.

Ключові слова: рідинна хроматографія, флюоресцентна та мас-спектрометрична детекція, імуноферментний аналіз, фармакокінетика.

Вивчення фармакокінетики ґрунтується головним чином на оцінці концентрації в організмі пацієнта лікарської речовини (ЛВ) у певні моменти часу після прийому препарату. Об'єктом дослідження служать кров (цілісна, сироватка, плазма), сеча, слина, кал, жовч, амніотична рідина та ін. Найбільш доступні і частіше досліджуються зразки крові та сечі.

Вимірювання концентрації ЛВ можна розділити на два етапи: 1 - виділення конкретної лікарської речовини з біологічного об'єкта, концентрування досліджуваної сполуки, відокремлення її від основних ендогенних компонентів; 2 - поділ суміші сполук, ідентифікація ЛХ та кількісний аналіз.

Вивчення концентрації препарату в крові дає інформацію про тривалість циркуляції ліків в організмі, біодоступність препарату, вплив концентрації на фармакологічний ефект, терапевтичну та летальну дози, динаміку утворення активних або токсичних метаболітів.

Вивчення концентрації препарату у сечі дозволяє оцінити швидкість елімінації ЛХ та функцію нирок. Концентрація метаболітів у сечі – непрямий показник активності метаболізуючих ферментів.

Дослідження біологічного матеріалу включає вимірювання маси (об'єму) проби, вивільнення препарату (метаболітів) з 532

клітин проби, відділення цілих клітин (наприклад, при аналізі крові) або частин клітин (при аналізі гомогенатів тканин), додавання внутрішнього стандарту, відділення білків, очищення проби (центрифугування, фільтрація), процедури екстракції, реекстракції, концентрування та перетворення досліджуваних речовин у зручні для аналізу похідні, основні процедури обробки проб крові та сечі відповідно (рис. 1).

«Ідеальний» аналітичний метод вимірювання концентрації ЛВ повинен володіти високою чутливістю, специфічністю та відтворюваністю, можливістю роботи з малими обсягами, простотою підготовки матеріалу, дешевизною та легкістю обслуговування обладнання, надійністю та можливістю автоматизації, простотою роботи персоналу та універсальністю (можливість аналізу різних класів ЛВ) .

Для отримання достовірних даних необхідно робити поправку на стабільність діючої речовини та/або продукту (продуктів), а також ступінь її біотрансформації в біологічних середовищах, що аналізуються.

Валідація методу повинна проводитись з урахуванням його передбачуваного застосування, при калібруванні слід враховувати діапазон концентрацій досліджуваного зразка. Категорично не рекомендується застосовувати два або більше методи аналізу проб в тому самому матеріалі зі подібним діапазоном калібрувальних значень.

Існує велика кількість методів визначення концентрації ЛХ у біологічних рідинах: xроматографічні, мікробіологічні, спектрофотометричні, полярографічні, імунологічні (радіоімунні, імуноензимні), радіоізотопні та інші методи.

Критичними параметрами методу є чутливість, швидкість, точність, можливість роботи з малим обсягом біоматеріалу та вартість.

У табл. 1 порівнюються аналітичні методи аналізу ЛХ.

Найбільш широко (до 95% досліджень) на практиці застосовується метод високоефектив-

Рис. 1. Основні процедури обробки проб крові та сечі.

ної рідинної хроматографії (ВЕРХ) з різними видами детекції.

Перевагами ВЕРХ у порівнянні, наприклад, з методом газорідинної хроматографії (ГЖХ) є відсутність обмежень щодо термостабільності аналізованих препаратів, можливість роботи з водними розчинами та летючими сполуками, використання варіантів «нормальнофазної» та «наверненофазної» хроматографії. Багато видів детекції є неруйнівними.

імуноферментний, ВЕРХ із флуоресцентною детекцією, ВЕРХ із мас-спектрометричною детекцією, які нині активно застосовуються у фармакокінетичних дослідженнях.

Імуноферментний метод

Метод імуноферментного аналізу (ІФА) запропоновано на початку 70-х років минулого сторіччя. Принцип ІФА полягає у взаємодії специфічних білкових ан-

Порівняльна характеристика методів аналізу лікарських засобів

Методи Абсолютна чутливість, г Чутливість, бали Складність, бали Виборчість, бали Універсальність Сумарна оцінка, бали

Рідина хроматографія:

УФ-детектор 10-7 3 -3 4 4 8

флуоресцентний детектор 10-8 - 10-9 4 -3 5 2 8

мас-спектрометричний детектор 10-11 - 10-12 5 -5 5 4 9

Імунологічні 10-10 - 10-11 5 -1 4 1 9

Газова хроматографія:

електронозахоплювальний детектор 10-10 5 -4 4 2 7

полум'яно-іонізаційний детектор 10-8 - 10-9 4 -3 2 4 7

ми; методи детекції, що використовуються в ВЕРХ, мають більш високу специфічність.

Розглянемо особливості високочутливих методів, що дозволяють аналізувати нанограмові кількості ЛХ (табл.1):

тител з аналізованою речовиною, яка виступає в ролі антигену. Чим вище концентрація речовини-антигену, тим більше утворюється комплекс антиген-антитіло. Для кількісного аналізу комплексоутворення при-

змінюють два підходи – з попереднім відділенням комплексу (гетерогенні методи) або без його відділення (гомогенні методи). У тому та іншому випадку пробу з невідомою концентрацією аналізованої речовини додають до сироватці, в якій антитіло пов'язано в комплекс з міченим аналогом досліджуваної речовини, і речовина з проби, що аналізується, витісняється з комплексу. Кількість витісненого міченого аналога пропорційно концентрації речовини у пробі. Визначивши, скільки міченого аналога виявилося витіснено з комплексу (або, навпаки, залишилося пов'язаним), можна розрахувати потрібний рівень речовини в пробі. Попередньо проводиться калібрування з використанням стандартних розчинів (зі стандартними концентраціями речовини, що тестується).

Випускаються набори реактивів - звані діагностикуми (антисироватка, з'єднаний із препаратом фермент, субстрат, кофактор, стандартні розчини для калібрування), розраховані на 50-200 аналізів. Для аналізу зазвичай достатньо 0,05-0,2 мл сироватки хворого.

Імуноензимні методи мають високу чутливість і специфічність. Діагностикуми порівняно дешеві та мають більш тривалі терміни придатності, ніж набори для радіоімунних методів. При використанні ІФА усувається необхідність відокремлення комплексу антиген-антитіло - досить складної процедури з відносно високим ризиком помилки. Ім-муноензимний метод може виконуватися в будь-якій лікарняній або поліклінічній лабораторії; розроблено прилади, які забезпечують повну автоматизацію аналізу.

Простота аналізу, висока чутливість, точність, відтворюваність,

помірна вартість апаратури і реактивів - усе це створює перспективу широкого застосування імунологічних методів у медичну практику.

Високоефективна рідинна хромотографія з флуоресцентною детекцією

При ВЕРХ детектор генерує електричний сигнал, сила якого пропорційна концентрації аналізованої речовини, розчиненої в рухомій фазі. У перших рідинних хроматографах (іонообмінних) рухома фаза, що пройшла через колонку, з компонентами проби збиралася в невеликі судини, а потім за допомогою титрометрії, колориметрії, полярографії і т.д. визначалося зміст компонента у цій порції. Іншими словами, процеси поділу проби

та визначення її кількісного складу були поділені в часі та просторі. У сучасному рідинному хроматографі ці процеси забезпечуються одним приладом.

Для детекції компонентів проби може бути використана будь-яка фізико-хімічна властивість рухомої фази (поглинання або випромінювання світла, електропровідність, показник заломлення і т.д.), яке змінюється за наявності в ній молекул сполук, що розділяються. З існуючих 50 фізико-хімічних методів детекції нині активно використовують 5-6.

Чутливість - найважливіша характеристика детектора. Якщо визначати чутливість через подвійну амплітуду шуму нульової лінії, а шум виражати у фізичних одиницях, то чутливість фотометричного детектора виражатиметься в одиницях оптичної щільності, рефрактометричного – в одиницях показника заломлення, вольтам-перометричного – в амперах, кондуктометричного – в амперу. У фармацевтичному аналізі чутливість виражають у мінімальній кількості речовини, що визначається. Ступінь чутливості різних типів детекторів наведено у табл. 1.

Незважаючи на те, що в даний час 80% хроматографів оснащено в базовій комплектації спектрофотометричних детекторів, все більшого поширення набуває флуоресцентна детекція, особливо при визначенні концентрації сполук, здатних «світитися» під дією збуджуючого випромінювання. Інтенсивність люмінесценції пропорційна інтенсивності збуджуючого світла. Дослідження спектрів випромінювання (флуоресценції та фосфоресценції) - більш чутливий та специфічний метод, ніж дослідження спектрів поглинання.

Спектр флуоресценції речовини у багатьох випадках є дзеркальним відображенням смуги поглинання з найменшою енергією і зазвичай розташовується поруч із цією смугою з її довгохвильової сторони. Даний метод найбільш зручно застосовувати при дослідженні лікарських препаратів, що мають власну флуоресценцію (хлорохін, доксорубіцин, доксазозин, атенолол, індометацин, пропранолол, тетрацикліни, хінідин та ін.). Деякі ЛВ можна порівняно легко перетворити на флуоресцентні сполуки (процес дериватизації), наприклад гідрокортизон (обробка сірчаною кислотою), меперидин (конденсація з формальдегідом), 6-меркап-топурин та метотрексат (окислення перманганатом калію). Інші препарати з активними функціональними групами можна конденсувати з флуоресцентними реа-

гентами - флуорескаміном (хлордеазепок-сид, новокаїнамід, сульфаніламіди та ін), 7-нітробензо-2,1,3-оксадіазолом (пропокси-фен та ін) і т.д. Разом з тим, необхідно зазначити, що при високій чутливості та селективності флуоресцентні методи детектування обмежені колом ЛХ, що мають природну флуоресценцію, а процес дериватизації при кількісному аналізі вимагає великих витрат.

Високоефективна рідинна хроматографія з мас-спектрометричною детекцією

Високочутливим варіантом сучасного детектора для ВЕРХ, що застосовується для фармакокінетичних досліджень, є мас-спектрометрометр. Мас-спектрометричний детектор дозволяє значно скоротити час аналізу, зокрема, за рахунок виключення підготовчої стадії (екстракції). Даний метод дає можливість одночасно ідентифікувати кілька речовин, і це виключає помилки, пов'язані з наявністю компонентів, що не розділяються.

Мас-спектрометрія – один із найбільш перспективних методів фізико-хімічного аналізу лікарських засобів. Традиційно органічна мас-спектрометрія використовується для вирішення двох основних проблем: ідентифікації речовин та вивчення фрагментації іонізованих молекул у газовій фазі. Сполука мас-спектрометра з рідинним хроматографом значно розширила можливості класичного методу. З появою нових методів іонізації, таких як «електроспрей» (ESI – англ. electrospray ionization) – іонізація в електричному полі при атмосферному тиску) та «МАЛДІ» – іонізація лазерною десорбцією, список молекул, які можуть бути вивчені даним методом, значно розширився.

В даний час комбінація ВЕРХ та мас-спектрометричного детектора з «електроспреєм» знайшла широке поширення у дослідженні фармакокінетики та біоеквівалентності лікарських препаратів. Спочатку метод ESI розробили під керівництвом Л.Н. Галль, а в 2002 р. Д. Фен-ну і К. Танаке була присуджена Нобелівська премія за розробку методів ідентифікації та структурного аналізу біологічних макромолекул і, зокрема, методів мас-спектрометричного аналізу біологічних макромолекул. У механізмі утворення іонізованих частинок виділяють три стадії. Перша – утворення заряджених крапель на зрізі капіляра. За допомогою напруги відбувається перерозподіл заряду в розчині, позитивні іони скап-

ливаються біля виходу. При сильному прикладеному полі (3-5 кВ) утворюється струмінь з вершини конуса, який далі розлітається на дрібні краплі. Друга стадія - поступове скорочення розмірів заряджених крапель за рахунок випаровування розчинника та подальшого розпаду крапель аж до отримання істинних іонів. Заряджені краплі рухаються крізь атмосферу до протилежного електрода. Третя стадія - цикли поділу і зменшення обсягу крапель, що повторюються, до повного випаровування розчинника і утворення іонів у газовій фазі.

Сучасні РХ-МС системи (LC/MS - англ. liquid chromatography/mass-spectrometry) дозволяють реєструвати повний іонний струм (TIC - англ. total ion current), проводити контроль заданих іонів (SIM - англ. реакцій селективне моніторування реакції (SRM – англ. selected reaction monitoring).

При аналізі повного іонного струму (TIC) отримують дані про всі сполуки, що послідовно виходять з хроматографічної колонки. Мас-хроматограми нагадують хроматограми з УФ детекцією, при цьому площа під піком відповідає кількості речовини. При визначенні заданих іонів (SIM) оператор може обмежити діапазон детекції необхідних сполук, виділивши, наприклад, мінорні речовини. Найбільшу чутливість і специфічність має SRM-метод, коли реєстрація іонного струму йде по одному обраному іону, характерному для досліджуваного з'єднання (при ESI-іонізації та реєстрації позитивних іонів це, як правило, молекулярний іон МН+).

У нещодавно опублікованих роботах обговорюється можливість кількісного аналізу органічних речовин у біологічних об'єктах без хроматографічного поділу за допомогою мультионної детекції та внутрішнього контролю у вигляді міченого дейтерієм аналога. Зокрема, для молекул ліпідної природи визначено діапазон концентрацій (від пико- до наномолей), за якого автори спостерігали лінійну залежність інтенсивності іонного струму від концентрації речовини. Збільшення концентрації сполук у розчині призводило до іон-молекулярних взаємодій у процесі іонізації та порушення лінійності.

Описаний метод кількісного визначення простагландинів та поліненасичених жирних кислот з використанням електроспрей-іонізації - мас-спектрометрії без хроматографічного поділу із застосуванням внутрішнього стандарту та реєстрації негативних іонів. В роботі

Ю.О. Каратассо та І. В. Логунової чутливість мас-спектрометрії при дослідженні потенційного антиаритмічного засобу склала 3 нг/0,5 мл плазми крові.

При виборі аналітичного методу необхідно на увазі, що використання ІФА лімітується наявністю обов'язкових реактивів, флуоресцентної детекції, необхідністю власної флуоресценції у досліджуваного з'єднання. Хоча при мас-спектрометричній детекції вищезгадані обмеження несуттєві, проте вартість обладнання на сьогоднішній день залишається досить високою, і даний вид аналізу потребує спеціальних навичок.

ЛІТЕРАТУРА

1. Александров М.Л., Галль Л.М., Краснов Н.В. та ін Екстракція іонів з розчинів при атмосферному тиску - новий метод мас-спектрометричного аналізу // Докл. Акад. наук СРСР. – 1984. – Т.277. - № 2. -

2. Каратассо Ю.О, Логунова І.В., Сергєєва М.Г. та ін. Кількісний аналіз лікарських препаратів у плазмі крові з використанням електроспрей іонізації - мас-спектрометрії без хроматографічного поділу // Хім. фарм. журн. – 2007. – № 4. – С. 161-166.

3. Каратассо Ю.О, Альошин С.Є., Попова Н.В. та ін Кількісний аналіз простагландинів та поліне-насичених жирних кислот методом мас-спектро-метрії з іонізацією електророзпорошенням // Мас-спектрометрія. -2007. - Т.4. - У 3. – С. 173-178.

4. Холодов Л.Є, Яковлєв В.П. Клінічна фармакокінетика. - М:Медицина, 1985. - 463 с.

5. Covey T.R., Lee E.D., Henion J.D. High-speed liquid chromatography/tandem mass spectrometry for determination of drogs in biological samples // Anal. Chem. – 1986. – Vol. 58 (12). – P. 2453-2460.

6. Конференція report на аналітичні методи validation: bioavailability, bioequivalence і фармакокінетичні studies // J. Pharmac. sci. – 1992. – Vol.81. – P. 309-312.

7. De Long CJ, Baker PS, SamuelM. та ін. Molecular species composition of rat liver phospholipids ESI-MS/ MS: Ефект chromatography//J. Lipid Res. – 2001. – Vol. 42. – P. 1959-1968.

8. Electrospray Ionization Mass Spectrometry. Ed. R.B.Cole// Wiley. - New York, 1997.

9. Han X., Yang K., Yang J. та ін. Factors influencing electrospray intrasource separation і selective ionization glycerophospholipids // Am. Soc. Mass Spectrom. – 2006. – Vol. 17(2). – P. 264-274.

10. Koivusalo M., Haimi P., Heikinheimo L. та ін. Quantitative determination of phospholipids compositions by ESI-MS: Effects of acyl chain length, unsaturation, and lipid concentration on instrument response // J. Lipid Res. – 2001. – Vol. 42. – P. 663-672.

11. Lee M.S., Kerns E.H. LC/MS applications in drug discovery//Mass Spectrom. Rev. – 1999. – Vol. 18 (3-4). – P. 187-279.

Надійшла 28.05.10.

ANALYSIS OF DRUGS IN PHARMACOKINETIC STUDIES

DV. Reikhart, V.V. Чистаков

Виявлений був наслідком чутливих і специфічних аналітичних методів для вивчення фармакокінетичних методів. Shown були розпорядження і обмеження імунітему-аналізу, високої ефективності хімічної хроматографії з fluorescence і масою спектрометричної відкриття. Використання методу в ході лікування фармакокінетичних методів у всіх випадках слід визначити, що структура комп'ютера та laboratory equipment.

Key words: хімічна хроматографія, fluorescence і маса спектрометричної відкриття, імуно-enzyme аналізу, фармакокінетики.